Question

基因工程问题

1.目的基因转录翻译还是质粒进行转录翻译
2.经过PCR仪的扩增，然后导入哪里
3.比如我想合成一种抗虫棉，那受体细胞是抗虫棉细胞还是大肠杆菌？

Answer 1

第一个问：(其实这个问题问得有点模糊)
一般来说，目的基因要和表达载体进行连接后才可以进行正常的转录和翻译。这里的表达载体分为原核表达载体和真核表达载体。其中，原核表达载体一般是质粒型的，目的基因的转录和翻译是质粒（表达载体）上进行的，而利用了宿主菌的RNA聚合酶、tRNA和rRNA等。真核表达载体又可以分为质粒型和基因组型，质粒型和原核比较类似；基因组型的一般表达载体可以通过与真核生物的基因组进行同源重组而将目的基因导入宿主细胞的基因组（染色体）中，从而使得目的基因表达和翻译为蛋白质。
第二个问：
1.PCR是一种常规的获得目的基因的方法，所得的目的基因一般由于Taq DNA聚合酶的原因会在新和成的双链DNA的头和尾分别添加一个“A”，因此可通过T载体进行克隆（一般叫做亚克隆）。克隆到T载体，其实是对目的基因的一种保存方法。因为，重组的质粒将导入大肠杆菌中并通过保存菌种是的目的基因得以长期保存。
2. 也有通过PCR的方法在目的基因前后添加酶切位点的做法，并且酶切位点前一般会设计多个保护碱基。这样，目的基因不用通过与T载体连接就可以直接和已经用相同酶切过的表达载体来进行连接。最终，使得目的基因表达。
第三个问：（比较复杂了）
1. 首先要获得抗虫基因。这个很多教科书有介绍
2. 将抗虫基因连接到植物表达载体上（一般该载体可通过左右边界整合到植物基因组中）。
3. 培养棉花的愈伤组织；
4. 将构建好的载体转入农杆菌中；
5. 通过农杆菌介导的转基因方法，将目的基因导入棉花愈伤组织。
6. 筛选转基因成功的阳性植株。
大概就是这些，说起来简单，其中还有很多复杂的过程。如果有兴趣可以看点基因工程的书。希望我的回答对你有帮助~！

Answer 2

目的基因转移到质粒上，随着质粒的转录复制，目的基因也被转录复制并翻译出了

追问

质粒不是扩增吗 为什么还转录复制？还有第二三题

追答

质粒的转录复制不就是扩增过程吗。
　PCR即聚合酶链式反应，其实是一种DNA的快速扩增技术，现在广泛地应用于生命科学研究、食品卫生、医疗、法医及环境监测等诸多方面，通常是用来作为被对照的一组DNA.
受体细胞是大肠杆菌，将能表达的大肠杆菌再转移到棉花细胞里

追问

就是说要用PCR仪代替导入受体细胞进行扩增对吗

追答

嗯，是的，一般是大量扩增一段基因

Answer 3

目的基因转移到质粒上，随着质粒的转录复制，目的基因也被转录复制并翻译出了

追问

能再详细一点吗