Question

求英文翻译

The following antibodies were used: MYC (9B11, Cell Signaling), CHK2 (BD Biosciences), hRAD50 (Novus, NB100-154SS), hUBR5 (EDD) (Santa Cruz, sc-9562), Flag (Sigma, F7425) or HA (Covance, 16B12), γH2AX (Millipore, JBW301), 53BP1 (Novus, NB 100-304), GFP (Invitrogen, A6455), BRCA1 (a gift from X. Yu), RNF168 (a gift from D. Durocher) and FK2 (Millipore, 04-263).
For immunoprecipitation the following antibodies were used: MYC (9B11, Cell Signaling) and Flag M2 affinity gel (Sigma, A2220). Quantification of immunofluorescence experiments was performed by counting at least 200 cells per condition. Data from three independent experiments were used to calculate median value and standard deviation.
shRNA
pLKO lentiviral vectors were used to express shRNAs directed against the following targeting sequences: 5′-GCTCAGTATTTACCAAGAATT-3′ (Brcc3), 5′-GTCCATCCAAGTGGAGTACAT-3′ (Otub1), 5′-CCCATTCAGTATCCTGGCTT-3′ (Rap80) and 5′-AACCAGATGTCTGTACTAAGG-3′ (Brca1).
Purification of protein interacting with the iDDR region
HEK293 cells were transfected with Flag-tagged TRF1 or Flag-tagged TRF1iDDR. Cells were lysed (50 mM Tris–HCl, pH 7.5, 150 mM NaCl, 1 mM EDTA buffer, 0.5% Triton X-100) and immunopurified with anti-Flag agarose resin (Sigma). After washing, proteins were eluted by competition with Flag peptide (Sigma). For mass spectrometry analysis samples were denatured, reduced and alkylated before an overnight digestion with trypsin.

Answer 1

使用以下抗体：myc（9b11，细胞信号），Chk2（BD Biosciences），hRad50（新闻，nb100-154ss），hubr5（EDD）（圣克鲁斯，sc-9562），旗（σ，f7425）或HA（科文斯，16b12），γH2AX（微孔，jbw301），53BP1（新闻，铌100-304），GFP（Invitrogen，a6455），BRCA1（x余礼物），RNF168（D.迪罗谢礼物）和FK2（微孔，04-263）。免疫沉淀后抗体：myc（9b11，细胞信号）和标记M2亲和凝胶（σ，a2220）。免疫荧光实验量化是由至少200的细胞数进行计数的条件。从三个独立的实验数据被用来计算平均值和标准deviation.shrnaplko慢病毒载体被用来表达对下面的靶向序列的shRNAs：5′- gctcagtatttaccaagaatt-3′（brcc3），5′- gtccatccaagtggagtacat-3′（分布），5′- cccattcagtatcctggctt-3′（RAP80）和5′- aaccagatgtctgtactaagg-3′（BRCA1）。与iddr regionhek293细胞相互作用蛋白的纯化转染标记或标记trf1iddr TRF1旗旗。细胞裂解（50？–毫米的Tris HCl，pH值？7.5 150？mM NaCl，1？毫米EDTA缓冲液，0.5%的Triton X-100）和免疫纯化的抗旗琼脂糖树脂（西格玛）。洗涤后，蛋白质的肽竞争洗脱（σ）旗。质谱分析的样品进行变性，还原和烷基化的胰蛋白酶消化前一夜。

Answer 2

下面的抗体被使用:教育署学校活动组(9 b11、细胞信号传递)、相关(BD生物科学),hRAD50(罗福斯,nb100 - 154 - ss),hUBR5(EDD)(圣克鲁斯,sc - 9562)、旗(σ,F7425)或公顷(Covance,16 b12),γH2AX(微孔,JBW301),53 bp1(罗福斯,注100 - 304),GFP(表达载体,A6455),BRCA1(一个礼物从x Yu),RNF168(一个礼物从d . Durocher)和FK2(微孔,04 - 263)。
　　对于免疫沉淀反应以下抗体被使用:教育署学校活动组(9 b11、细胞信号传递)和旗M2亲和力凝胶(σ,A2220)。量化的免疫荧光实验是由计数至少200细胞/条件。三个独立实验的数据被用来计算中值和标准偏差。
　　shRNA
　　pLKO lentiviral向量被用来表达shRNAs针对以下目标序列:5′′-GCTCAGTATTTACCAAGAATT-3(Brcc3)、5′′-GTCCATCCAAGTGGAGTACAT-3(Otub1)、5′′-CCCATTCAGTATCCTGGCTT-3(Rap80)和5′′-AACCAGATGTCTGTACTAAGG-3(Brca1)。
　　纯化的蛋白质相互作用与iDDR地区
　　HEK293细胞子转染与旗标记或标记标记TRF1iDDR TRF1。细胞细胞溶解(50毫米,pH值为7.5,三盐酸氯化钠150毫米,1毫米EDTA缓冲区,0.5%法螺x - 100)和immunopurified与反旗琼脂糖树脂(σ)。洗后,蛋白质是由竞争eluted与旗肽(σ)。质谱分析的样本变性、减少和烷基化与胰蛋白酶消化前一夜