分子生物学
现有基因5‘hind3Sa1IEcoR13’已知共序列，如何把它与puc18链接在一起构成重组质粒？至少用两种方法。...
现有基因5‘ hind3 Sa1I EcoR1 3’
已知共序列，如何把它与puc18链接在一起构成重组质粒？至少用两种方法。 展开
已知共序列，如何把它与puc18链接在一起构成重组质粒？至少用两种方法。 展开
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其实两个方法一般情况下区别不大。
1、先连接hind3 Sa1I EcoR1和puc18。两个基因分别PCR以后，用连接酶试接，形成复合的双基因片段，在电泳后挑出符合大小的片段（复合片段的大小基本上是两个基因大小之和，更大的是重复连接了很多次的）。再将这个片段转进质粒。然后转进模式细菌筛选。麻烦的是两个基因的连接，很容易出现乱接和环形片段。
2、直接双基因重组进质粒。两种基因直接与质粒进行连接，之后转进感受态筛选。麻烦的是质粒筛选。
第二种方式总的来说更麻烦，因为细菌培养更费时间。当然如果你们直接送去测序就当我没说。
1、先连接hind3 Sa1I EcoR1和puc18。两个基因分别PCR以后，用连接酶试接，形成复合的双基因片段，在电泳后挑出符合大小的片段（复合片段的大小基本上是两个基因大小之和，更大的是重复连接了很多次的）。再将这个片段转进质粒。然后转进模式细菌筛选。麻烦的是两个基因的连接，很容易出现乱接和环形片段。
2、直接双基因重组进质粒。两种基因直接与质粒进行连接，之后转进感受态筛选。麻烦的是质粒筛选。
第二种方式总的来说更麻烦，因为细菌培养更费时间。当然如果你们直接送去测序就当我没说。
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1、先连接hind3 Sa1I EcoR1和puc18。两个基因分别PCR以后，用连接酶试接，形成复合的双基因片段，在电泳后挑出符合大小的片段（复合片段的大小基本上是两个基因大小之和，更大的是重复连接了很多次的）。再将这个片段转进质粒。然后转进模式细菌筛选。麻烦的是两个基因的连接，很容易出现乱接和环形片段。
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DNA重组，
追问
拜托。两种。而且你那个也太简单了吧
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