Question

有一个A肽，经过酸水解后分析其氨基酸组成，得知由Lys、His、Asp、 Ala、Val、Tyr和

有一个A肽，经过酸水解后分析其氨基酸组成，得知由Lys、His、Asp、
Ala、Val、Tyr和2个Glu及2个NH3组成。（1）FDNB与A肽反应后酸水解得DNP-Asp；（2）用羧肽酶水解A肽得到游离的Val；（3）用胰蛋白酶水解A肽得2种肽段，一个肽段（Lys、Asp、Glu、Ala、Tyr）在pH6.4时净电荷为0；另一个肽段（His、Glu、Val）与FDNB反应后水解得到DNP-His，且此肽段在pH6.4时带净正电荷；（4）用糜蛋白酶水解A肽，得到2个肽段。一个肽段（Asp、Ala、Tyr）在pH6.4时净电荷为0，另一个肽段（Lys、His、2Glu、Val）在pH6.4时净电荷为正。试推断该肽的氨基酸序列。

Answer 1

该多肽由Lys、His、Asp、Ala、Val、Tyr和2个Glu及2个NH3组成，可推出有两个氨基酸残基为酰胺：Asn和Gln或两个Gln。
由条件可得出：N端为Asp，C端为Val。
胰蛋白酶可降解Lys,Arg。故(1) Asp-(Glu,Ala,Tyr)-Lys-||-His-(Glu,Val)
胰凝乳蛋白酶可降解Phe,Trp,Tyr。故(2) Asp-Ala-Tyr-||-Glu-Lys-His-(Glu,Val)
在（1）中“||”之前的在pH6.4时，不带电荷，在“||”之后的带正电荷
在（2）中“||”之前的在pH6.4时，不带电荷，在“||”之后的带正电荷
结合氨基酸的结构和酸碱性可知序列为Asn-Ala-Tyr-Glu-Lys-His-Gln-Val