DNA复制中各种酶的作用□?
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酶的两大类:蛋白质酶,核酸酶。Taq聚合酶一般适用于DNA片段的PCR扩增。DNA解旋酶,DNA不连续复制过程中,结合于复制叉前面,催化DNA双链结构解链,并具有 ATP酶活性的酶,两种活性相互偶联, 通过水解ATP提供解链的能量。
(一)DNA聚合酶。
原核生物DNA聚合酶 大肠杆菌有DNA聚合酶I、II、III三种DNA聚合酶,其中DNA聚合酶III为细菌DNA复制的主力酶.特性:
(1)5’-3’聚合酶活性。
(2)3’-5’外切酶活性,起着校对功能。
(3)不具有5’-3’外切酶活性。真核生物DNA聚合酶 真核生物中存在α、β、γ、δ和ε五种DNA聚合酶.DNA聚合酶δ被认为是催化真核生物DNA复制的主力酶。
(二)引发酶——催化合成RNA引物.DNA聚合酶需要3’游离羟基,RNA聚合酶则不需要.原核生物由dnaG编码RNA聚合酶,真核生物DNA聚合酶α具有引发酶活性。
(三)DNA连接酶——连接双螺旋骨架上的冈崎片段,但不连接游离单股DNA分子。
(四)拓扑异构酶——消除正超螺旋,恢复负超螺旋。
(五)解链酶——识别复制叉的单链结构,解开DNA双链.(六)单链结合蛋白——保护DNA不被水解,不回复成双链。
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