Question

编写使用油镜观察血涂片中白细胞的详细操作步骤？

Answer 1

（一）样本采集
将静脉血采集于EDTA－K2抗凝剂中（浓度为每毫升血液含1.5～2.2mg EDTA－K2·H2O）。采血后立即混匀，应拒绝分析有肉眼可见凝块的样本。
（2）血涂片制备
血涂片制备是否合格、染色的好坏直接关系到检验结果的质量。
1、要求所用玻片清洁、干燥、无尘，大小为25 mm×75mm，厚度为0.8～1.2mm。使用载玻片时， 不要用手触及玻片表面。
2、做好明确标记。
3、使用EDTA－K2抗凝血液样本时，应在采集后4小时内制备血涂片。在制片前，样本应充分混匀。注意，样本不能冷藏。
4、每份样本制作3张血涂片。
5、如果样本中白细胞数量少时，需要制备更多血涂片（如6张）。
6、用楔形技术制备血涂片。在玻片近一端1/3处，加一滴（约0.05ml）充分混匀的血液，握住另一张较狭窄的、边缘光滑的推片，从血滴前沿方向接触血液，以30o～45o角使血滴沿推片迅速散开，快速、平稳地推动推片至玻片的另一端。
7、血细胞比容与涂片关系。血细胞比容高于正常时，红细胞较多，血液粘度较高，用较小的角度涂片，可获得满意的血膜。相反，血细胞比容低于正常时，血液粘度较低，需用较大角度涂片。
8、良好血涂片的要求
1) 血膜至少长25mm，至玻片两侧边缘的距离至少为5mm。
2) 血膜边缘要比玻片边缘窄，且边缘光滑，适用于油镜检查。
3) 血细胞从厚区到薄区逐步均匀分布，末端呈方形或羽毛状。
4) 血膜末端无粒状、划线或裂隙。所有这些情况会使白细胞集中在这些区域内。
5) 在镜检区域内，白细胞形态应无人为异常改变。通常，随着保存时间的延长，抗凝血会造成白细胞形态的改变，如胞浆内形成空泡，核分解破裂等。应将抗凝血液保存时间的影响减小到最低限度。除部分淋巴细胞增生性疾病外，镜检区域内破损白细胞量应<2％。
6) 无人为污染。
9、 血膜必须充分干燥，否则在染色过程中容易脱落