作为基因工程的载体必须具备哪些条件
1、在宿主细胞中能保存下来并能大量复制,且对受体细胞无害,不影响受体细胞正常的生命活动。
2、有多个限制酶(Restriction enzymes)切点,而且每种酶的切点最好只有一个,如大肠杆菌pBR322就有多种限制酶的单一识别位点,可适于多种限制酶切割的DNA插入。
3、含有复制起始位点,能够独立复制;通过复制进行基因扩增,否则可能会使重组DNA丢失。
4、有一定的标记基因,便于进行筛选。如大肠杆菌的pBR322质粒携带氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因,就可以作为筛选的标记基因。一般来说,天然运载体往往不能满足上述要求,因此需要根据不同的目的和需要,对运载体进行人工改建。当前所使用的质粒载体几乎都是经过改建的。
5、载体DNA分子大小应合适,以便操作。
扩展资料
一个理想的载体至少应具备下列五个条件:
1、具有对受体细胞的可转移性或亲和性,以提高载体导入受体细胞的效率;
2、具有与特定受体细胞相适应的复制位点或整合位点,使得外源基因在受体细胞中稳定遗传;
3、具有较高的外源DNA的载装能力,以满足长片段的克隆;
4、具有多种单一的核酸内切酶识别切割位点,有利于外源基因的拼接插入;
5、具有合适的选择性标记,便于重组DNA分子的检测。
载体的可转移性和可复制性取决于它与受体细胞之间严格的亲缘关系,不同的受体细胞只能使用相匹配的载体系统
参考资料来源:百度百科——载体
2024-11-29 广告