Question

如何评价色谱柱的选择性和柱效

Answer 1

色谱柱的选择性和柱效的评价如下：

对色谱柱的基础要求是：柱效高、选择性好，分析速度快等。目前市售的用于HPLC的各种色谱柱种类繁多，从色谱柱填料来分，可分为硅胶基质和有机杂化球基质的色谱柱，还有不同长短、不同微粒大小的色谱柱。

1、色谱柱的选择

可根据待分析样品的极性、分子量大小、是否可溶于水等因素来考虑。如样品分子量大于2000的，可溶于水的，可选择凝胶色谱柱、大孔径反相色谱柱、大孔径离子交换色谱柱。分子量小于2000的，溶于有机相的，可选择正相模式色谱柱。溶于水，可电离的样品可选择反相模式色谱柱或离子交换或未经涂渍亲水模式的色谱柱等。

2、色谱柱柱效

柱效受柱内外因素影响，为使色谱柱达到最佳效率，除柱外死体积要小外，还要有合理的柱结构及装填技术。即使最好的装填技术，在柱中心部位和沿管壁部位的填充情况总是不一样的，靠近管壁的部位比较疏松，易产生沟流，流速较快，影响冲洗剂的流形，使谱带加宽，这就是管壁效应。在一般的液相色谱系统中，柱外效应对柱效的影响远远大于管壁效应。