Question

血小板测定影响因素是什么？

Answer 1

目的 探讨影响血液细胞分析仪测定血小板(PLT)的因素，排除假性增高和假性降低情况，及时准确地为临床提供可靠的诊治依据。 方法 使用血液细胞分析仪（Sysmex Kx-21）及目视显微镜法同时对160余例血小板数与直方图不符标本进行计数，对比分析。 结果 血小板聚集、小红细胞数量、试剂的质量、抗凝剂的种类及比例、标本放置时间和反复混匀次数、血小板体积异常等均可影响血细胞分析仪准确计数PLT。 结论 血液细胞分析仪并不能完全代替显微镜计数，对PLT计数与直方图不符标本，应分析原因，用显微镜计数或重新采血。

　　【关键词】 血液细胞分析仪；血小板；直方图

血小板（PLT）检测是研究止血与凝血障碍的重要指标之一，也是其他血小板参数可靠性的基础，其检测结果的可靠性至关重要。血小板由于体积小，特别是容易发生粘附、聚集和变性破坏，故常难以准确计数。血液细胞分析仪的普及，大大提高了工作效率，但对血小板检测，其结果往往不很稳定。使用血细胞分析仪检测血小板的影响因素很多，现探讨如下。

　　1 材料与方法

　　1.1 仪器

　　血液细胞分析仪（Sysmex Kx-21），为日本Sysmex公司产品。

　　1.2 试剂

　　全部配套试剂和质控液。

　　1.3 检测方法

　　对日常标本进行分析，并对其中160余例血小板数量与直方图不符标本同时进行目视显微镜计数。

　　2 结果

　　2.1 正常与异常图形PLT镜检结果

　　见表1。从表1中可以看出，正常图形的标本，两种方法检测血小板的结果，在统计学上，差异无显著性。而异常图形的标本，两种方法检测血小板的结果，差异有显著性。表1 正常与异常图形PLT镜检结果(略)

　　2.2 不同MCV值血细胞分析仪与镜检法PLT结果比较

　　见表2。在MCV＞70fl时，血细胞分析仪法与显微镜法相比，差异无显著性。在MCV＜70fl时，血细胞分析仪法与显微镜法相比差异有显著性。表2 不同MCV值血细胞分析仪与镜检法PLT结果的比较(略)

　　3 讨论

采血过程中因操作缓慢、穿刺不顺、组织液混入，混匀不及时等均可促成血小板（PLT）聚集，导致计数结果偏低。在PLT直方图上提示有大颗粒存在，PLT聚集是影响PLT计数的主要原因。对此种情况进行了显微镜镜检，并与正常图形进行对比，由表1可看出，此种异常图形的出现，绝大部分是由PLT聚集所引起，结果极不可靠，须重新采血。

由于血小板（PLT）和红细胞（RBC）是在同一个检测系统中通过颗粒大小来加以鉴别的，大量小红细胞的存在可引起PLT上限区域的改变。在平均红细胞容积（MCV）大于70fl时，仪器一般无PLT上限区域干扰报警，血细胞分析仪法与显微镜法相比，差异无显著性。在MCV小于70fl时，仪器往往提示上限区域有干扰，红细胞直方图上显示有小红细胞存在，如表2所示。研究发现，MCV值越小，小红细胞数量越多，被记录的PLT数就越多，血小板计数值就越高，仪器法与镜检法相比差异越显著。此种现象可用流式细胞技术或二维激光散射技术避免［1］。实际工作中采用手工法亦可获得可靠的血小板计数值。

血细胞的检测结果，尤其是血小板（PLT）的结果，直接反映试剂的质量。原则上强调使用与仪器检测原理相匹配的试剂［2］。溶血剂是血细胞分析仪试剂中的主要试剂，能将红细胞溶解，并能使白细胞的体积发生规律性变化。理论上讲PLT计数时的脉冲大小只与稀释液的性能和仪器的设置有关，与溶血剂的性能无关。但实际工作发现，若溶血不完全，由于红细胞碎片冲洗不彻底将引起PLT假性增高。此外，稀释液的渗透压、离子强度等亦可影响检测结果。特别注意的事，试剂应避免污染，否则，杂质微粒会使本底增高，导致最后计数结果偏高。

　　抗凝剂的种类对检测结果影响较大，国际化学标准化委员会（ICSH）推荐用EDTA二钾抗凝。另外，血液和抗凝剂比例也会影响检测质量。血液比例过高时，由于抗凝剂相对不足，血浆中出现微血块的可能性增加。微凝块可能堵塞仪器影响检测结果。如果血少，抗凝剂的浓度增高，血小板会肿胀、崩解、产生正常PLT大小的碎片，从而无法得出正确的结果［3］。

　　齐天蕊等［4］的研究表明，标本放置时间太长，易产生巨大血小板，这种巨大血小板分布于红细胞直方图的100～250fl处，引起血小板计数偏低，平均红细胞容积偏高。此外，全血标本需不断混匀，2h内完成测定。

　　在正常情况下，血细胞分析仪对血细胞体积的识别有明显的体积界限：PLT2～30fl。根据Coulter原理，仪器只识别颗粒大小而不能识别颗粒的性质。当其体积异常超过该仪器设定的阈值，往往会造成误判。从表1来看，大PLT引起仪器计数结果偏低。一般来说，PLT体积异常小的情况极少见，故不作讨论。

此外，在血小板（PLT）体积分布图上，2～3fl粒子过高时，图形左移甚至缩窄呈“尖峰”样，此种情况除血小板体积偏小外，常有红细胞碎片、冷凝球蛋白、红细胞夹杂物等引起，一起致计数结果增高［5］。有报道认为，白血病细胞、皮下脂肪滴污染及标本的细菌污染等，亦能引起PLT测定值偏高，有待进一步探讨。由此可见，PLT计数是否准确，应结合直方图进行判断，必要时进行显微镜计数或重新采血。

　　【参考文献】

　　1 朱忠勇.准确计数血小板方法学研究进展.国外医学·临床生物化学与检验学分册，2002，23(3)：131-132.

　　2 朱芸.不同血液分析仪试剂使用的比较.河北医药，2000，22(11)：854-855.

　　3 刘健.抗凝剂对血小板及其参数检测结果的影响分析.国际医药卫生导报，2004；10(8)：64-65.

　　4 齐天蕊.血小板计数误差与标本放置时间关系的探讨.医学文选，2003，22(4)：532.

　　5 李兴武.全自动血细胞分析仪计数血小板影响因素分析及纠正.中国误诊学杂志，2002，2(3)：387-389.

　　作者单位： 201318 上海，上海市南汇区周浦医院检验科