Question

2008年的一道生物题高考的一小问 跪求解释

32．（8分）将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。

请根据以上图表回答下列问题。
（1）在采用常规PCR方法扩增目

的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是 。
（2）PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？__________。
（3）图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？ 。
（4）为将外源基因转入马铃薯，图1步骤⑥转基因所用的细菌B通常为 。
（5）对符合设计要求的重组质粒T进行酶切，。假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。
①采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切，得到_________种DNA片断。
②采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切，得到_________种DNA片断。
答案：（1）耐高温 2）引物对B （3）否 （4）农杆菌 （5）①2 ②1
问的是第5问

Answer 1

额、、这个嘛。
首先①：你切了以后，重组质粒中，两个EcoRI切点拼在一起的，构成了一个新的EcoRI切割位点，那么你用EcoRI切就可以把重组质粒切断，然后，在目的基因内部有一个PstI切点，那么用PstI来切的话，就可以再次将重组质粒切断了，那么两个断口，你想想看，是不是就把这个圆形的质粒切成了两种DNA片段？
②：同样的道理，你看看质粒和目的基因分别被限制酶切了过后，拼在一起，那么AluI切点和SmaI切点拼在一起后，成了AGGGG而这个位点在表中没有对应的限制酶来切了，所以你用的EcoRI和
TCCCC
SmaI就只有EcoRI能切重组质粒，只有一个切口，质粒又是圆形的，那不就只有一种DNA了嘛~~~

追问

AluI切点和SmaI切点能拼在一起奥？

追答

AluI和SmaI切出来的都是平末端啊~~~平末端是可以拼在一起的。。

Answer 2

由图1－①过程可知，用E酶和A酶切割抗原基因DNA片段会得到XY片段，由图1－②过程可知，用E酶和S酶切割质粒产生MN片段。这样形成的两个DNA片段用DNA连接酶连接形成重组质粒。其中X、M连接处是E酶切割位点，M、N之间还有一个P酶切割位点。如果用E酶和P酶切割重组质粒，将会在两个切割位点切割产生2种DNA片段。但若用E酶和S酶切割重组质粒，由于只有一个切割位点（E酶切点），因此只得到1种DNA片段。