Question

植物基因组DNA，PCR没有条带

这是我提的植物基因组DNA ,PCR没有条带，帮我看看基因组提的有没有问题，怎么才PCR能出来呢

Answer 1

基因组提的没有问题，但是你点Maker不合适，需要点大Maker。

PCR没有结果的原因有：

• PCR体系中的缓冲液没有镁离子

• 引物不合适，换引物试试

• 取合适的模板，不是条带最亮的那种而是条带单一的

• 聚合酶失效了

• PCR运行体系有问题，比如退火温度不合适，延伸时间等

对策：1.纯化模板或者使用试剂盒提取模板DNA或加大模板的用量

          2.更换Buffer或调整浓度

          3.重新设计引物（避免链间二聚体和链内二级结构）或者换一管新引物

          4.降低退火温度、延长延伸时

Answer 2

你这张图就说明了原因 ：DNA模板加太多了！
所有的样都有那么大的片段，那就是你加的基因组DNA模板，pcr之前测一下基因组DNA浓度，50u体系加50ng模板就足够了，看图上这亮度，恐怕你要稀释1000倍再试试

Answer 3

pcr失败有很多原因，如果做其它pcr没问题的话，考虑一下引物