Question

请教您一个问题 我知道每个细胞有3万个基因但在每个细胞中约有百分之20，不同细胞中表达的这百分之20的

基因也是不同的 我想问的是我取一个人体肝细胞制成DNA文库 从中筛选出脑发育的基因我知道这个脑发育基因在肾细胞中是不表达的。 我想把这个脑发育基因在皮肤细胞中表达？ 有什么方法？

Answer 1

每个体细胞都带有全套的基因，只不过受到DNA甲基化等因素的调控，只表达其中的一小部分。
你要达到的目的很容易，现在有两种手段。一是把目标基因cDNA序列插入表达载体，比如质粒或者病毒，表达载体进入你选中的细胞就可以表达这些基因了。还有就是通过基因工程的手段，把靶基因插入到目标细胞的基因组，并且在前面插入强表达启动子，这样实现了转基因，也可以表达

追问

您好 我想在确认一下 我想问的是在肝细胞中一个没有表达的基因 ， 把这个没有表达的基因放到皮肤细胞中表达 用什么方法可以将这个在肝细胞中没有表达的基因 放到皮肤细胞中表达。

追答

先克隆cDNA，插入表达载体，然后把载体导入皮肤细胞

追问

您好 我所知道的cDNA文库只有一个细胞中所有表达的基因才被能制作成cdna文库 ，我请教的是肝细胞一个没有表达的基因，就不能制作成cDNA文库，好像只能制作成DNA文库 我请教的是从肝细胞DNA文库中分离出来的一个没有表达的基因 好像是被甲基化的被调控因子控制着的是没有表达的 请教在体外细胞中怎样将这个没有表达的基因表达呢？

追答

你说的这种情况在体外是无法正确表达的，一是因为DNA文库并不能保证该基因的全长正好在一个载体之内。而是内含子无法剪切。体外的DNA文库不涉及到甲基化。一定要表达该基因，只有用表达该基因的细胞来做cDNA
还有一个就是在肝细胞可以用药物处理，去甲基化，可以诱导表达，不过这样做的意义不大

Answer 2

。。。科学家们还需要努力。动物细胞的全能性暂时没有得到完整表达。