Question

关于实时荧光PCR检测2-△△Ct计算结果？

实验组和对照组，将内参基因和目的基因各做三个重复。
内参基因的Ct值得到三个数据，取平均值。
将目的基因的三个Ct值与Ct-actin相减，得到三个delta Ct
实验组的delta Ct－对照组的delta Ct，得到三个delta delta Ct。
这样在计算得到三个倍数，去做显著性分析 对吗？

Answer 1

你这个得到的只是一次试验的数值，做统计学有什么意义呢，最多就是分析了你加样和仪器的误差而已。

显著性分析是要至少三次完全独立的实验，也就是实验组，对照组的RNA都是重新做了实验，从头提取出来的，而不是各做三个重复。

追问

我昨晚也明白了是只有一次实验的数值。还有另一个问题，这样的计算方法是不是错误的。应该都用平均的Ct来计算吗？