Question

【求助】急切求教：western的灰度值可以做统计分析么？

Answer 1

1、打开IPP6.0软件，导入预先跑出的Western条带。

2、点击工具栏上的Measure-Count/Size，在Count/Size界面中的Measure中选择Select measurements 进行选择IOD参数。

3、在工具栏上选择不规则AOI，点击条带中的第一个条带，随后按住Ctrl键点击下一个条带，圈住最后一个条带时点击鼠标右键完成选择。

4、在Count/Size界面中点击CountJ键，软件就会自动对条带进行灰度计算。

5、在Count/Size界面中点击View中的Measurement Data，查看统计结果。

Answer 2

灰度值差异很大，这是肯定的，但是你也可以将目的条带和你的内参进行对比，每次都是一个相对的值，这样就不会受到灰度值差异的影响了。还可以将contol作为1，其余的以比值表示，这样也可以将灰度值化为比值，反正就是设立内参照，避免出现绝对灰度值即OK！ 三次独立的实验应该是从处理开始就完全独立的，而不是同一批次蛋白做三次western blot，在其中选出最具有代表性和能够说明问题的图片作为文章的图片，而最后形成的柱状图则是三次结果的统计处理后的结果，需要附加标准差的。