Question

POD酶测定

为什么我测定植物POD酶的时候，连最初计时需要的吸收值都达不到啊。各位高手帮帮忙，帮我想想原因和解决方法啊，谢谢啦。

Answer 1

1.反应速度
　　大多数酶促反应是可逆反应，其速度既受底物浓度的影响，也受产物生成量的影响。当底物浓度较高时，在反应的初期，其浓度变化甚微，产物生成量也很少，此时反应速度可看作是恒定的。酶反应动力学中所指速度就是反应的初速度。
　　2.底物浓度
　　米氏方程ν=νmax【s】/km+【s】是反映酶促反应速度与底物浓度关系的方程式，其中km称米氏常数。
　　km值是酶的特征常数之一，只与酶的性质有关，而与酶浓度无关。不同的酶，km值不同。同一个酶有几种底物时，则对每一种底物各有一特定的km值，其中km值最小的底物一般称为该酶的最适底物或天然底物。
　　综上所述，根据酶的特性及定量原理，测定酶活力时，必须注意以下几点：
　　（1）酶促反应过程中，只有最初一段时间内反应速度与酶浓度成正比，随着反应时间的延长，反应速度即逐渐降低。
　　（2）要规定一定的反应条件，如时间、温度、ph等，并在酶测定过程中保持这些反应条件的恒定，如温度不得超过规定温度的士1℃，ph应恒定。
　　（3）配制的底物浓度应准确且足够大，底物液中应加入不抑制该酶活力的防腐剂并保存于冰箱中，以防止底物被分解。
　　（4）标本要新鲜，由于绝大多数酶可因久置而活力降低，标本如无法及时测定，应保存于冰箱中。用血浆时，应考虑到抗凝剂对酶反应的影响。有些酶在血细胞、血小板中的浓度比血清高，为此在采血、分离血清时，应注意防止溶血和白细胞的破裂。
　　（5）在测定过程中，所用仪器应绝对清洁，不应含有酶的抑制物，如酸、碱、蛋白沉淀剂等。

Answer 2

最初需要吸光度吗?
是POD酶把无吸收的底物反应成有吸收的产物...使吸光度上升...所以最初不需要吸光度.