凝胶过滤法提取蛋白质的洗脱图谱为什么只出现一个峰值阿?本来应该是有两个的
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我是做了两次实验才成功,第一次只得到一个峰,第二次得到了两个峰。
原因我总结有如下几点:
1)、每支管收集的溶液量不一致,误差较大,导致只有一个吸收峰。
2)、可能是流速过快,小分子物质来不及扩散,与大分子物质一起被洗脱出来;或者是流速过慢,层析时间过长,小分子物质追上了大分子物质一起被洗脱出来。
3)、也可能是未能及时去接被洗脱出来的物质,有些成分已流出,只接到了后面流出来的物质,则为一个峰。
4)、样品未洗脱完全就终止了反应,小分子物质还停留在层析柱内,所以只收集到一种物质,只得到了一个峰。
【希望能帮到广大查询此问题的朋友们,因为我是被做实验报告讨论题给逼出来的。^_^】
原因我总结有如下几点:
1)、每支管收集的溶液量不一致,误差较大,导致只有一个吸收峰。
2)、可能是流速过快,小分子物质来不及扩散,与大分子物质一起被洗脱出来;或者是流速过慢,层析时间过长,小分子物质追上了大分子物质一起被洗脱出来。
3)、也可能是未能及时去接被洗脱出来的物质,有些成分已流出,只接到了后面流出来的物质,则为一个峰。
4)、样品未洗脱完全就终止了反应,小分子物质还停留在层析柱内,所以只收集到一种物质,只得到了一个峰。
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中科雷鸣
2024-11-08 广告
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分子筛层析通常要加入大于150毫摩的Nacl来防止蛋白质聚集沉淀的,你的平衡液中有吗?可能聚集而沉淀在柱子上了。
你跑完一个柱体积了吗?两个蛋白质相对分子质量相差大吗?若是不大,若果你的柱子分辨率不高的话,可能都在一个峰里面了。
你跑完一个柱体积了吗?两个蛋白质相对分子质量相差大吗?若是不大,若果你的柱子分辨率不高的话,可能都在一个峰里面了。
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原因有2个吧:
层析柱的分辨率不够高
每只管收集的溶液量不一致,误差较大,导致只有一个吸收峰.
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2013-10-22
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分离蛋白质 血红蛋白+高铁氰化钾 血红蛋白 高铁氰化钾
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不是这个
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