Question

如何用imagej分析免疫组化平均光密度值

Answer 1

1、打开Image-Pro Plus 6.0软件，点击右下方的Done。点击file，点击open，打开你要选择组化图片，点击打开，得到如图所示。

2、点击file那一排的measure，选择calibration右侧下方的intensity。点击OD旁边的new，点击std. optical density，点击options，

3、点击255旁边的image，弹出如图所示对话框，点击图中空白地方，点击ok键。将incidental level改成255。

4、继续点击ok，点红色x，关闭。点击measure→count/size。

5、点击selecte colors，点击最左边像笔的图标，选免疫组化图片阳性蛋白表达区域，选择完毕，点击close。

6、点击表格中的view，选择statistic。得到mean那一栏和iod交叉的数值，就是mean of iod。

Answer 2

1、载入图像，选择菜单ImageJ→Type→8-bi,t将彩色图像变为8位灰度图像。2、选择菜单ImageJ→Adujst→Threshold,选择合适的分割阈值,直到阈值化后的图像中所有细胞都呈高亮显示为止,然后单击“Apply“按钮,则整幅图像变为白色背景上只有细胞的二值图像，在较高版本的ImageJ中有预设值，对于跳虫计数来说“triangle”模式相对较为合适，并且在计数过程中，要将高亮设置为红色而不是黑白对照，这样才能在接下的步骤中顺利进行。3、选择菜单ImageJ→Analyze→Analyzeparticles…,在弹出的成分分析设置窗口输入要计数的最大和最小细胞的像素数、细胞按大小分群的群数和分析结果的显示方式等选项,然后单击“OK”,软件自动计数和标记所有符合要求的跳虫。最后就是保存结果啦。总结下子，ImageJ软件固然好用，其对图片本身的要求也较高，光线要均匀，培养基质与培养物的色差要明显，这样才能在后期的处理过程中减少工作量。还需进一步解决的问题依然是存在的，在较少工作量的基础上为了获得清晰地图片，在拍摄过程中，就必须处理好放大倍数和视野大小两者的矛盾，但目前没有找到很好的契合点，不知是不是要在硬件上有所改动~~也就是说，会不会有种在相机有这样的功能，放大倍数提高的同时，视野范围不变呢~~~~~？