用基因工程生产病毒疫苗的方法
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国外目前用生物反应器生产狂犬疫苗主要有两种工艺方法。
(1)在大型细胞培养罐(通常罐体积在800升至1200升之间)中,用Vero细胞作为宿主细胞,用球形微载体(商品名Cytodex-1)作为细胞生长载体,每升培养基只能加入3-5克微载体;批式培养,达到一定细胞密度后接种病毒。这种方法的缺点是显而易见的每升培养基所加的微载体太少,不能连续培养,生产过程中若造成污染损失巨大,因而产品成本特高,市场价格相应更高。
(2)在可以连续培养的7.5-30升生物反应器里用一种特别的搅拌桨(商品名Cell-LiftImpeller),以Vero细胞为宿主细胞,球形微载体(商品名Cytodex-1)作为细胞生长载体,每升培养基可加入25克微载体,连续培养,连续收获。此方法比较前一种虽然有改进,但在生物反应器上要配细胞沉降系统,而且微载体最多只能重复使用两次,设备投资较大,生产过程中耗材成本较高。
(1)在大型细胞培养罐(通常罐体积在800升至1200升之间)中,用Vero细胞作为宿主细胞,用球形微载体(商品名Cytodex-1)作为细胞生长载体,每升培养基只能加入3-5克微载体;批式培养,达到一定细胞密度后接种病毒。这种方法的缺点是显而易见的每升培养基所加的微载体太少,不能连续培养,生产过程中若造成污染损失巨大,因而产品成本特高,市场价格相应更高。
(2)在可以连续培养的7.5-30升生物反应器里用一种特别的搅拌桨(商品名Cell-LiftImpeller),以Vero细胞为宿主细胞,球形微载体(商品名Cytodex-1)作为细胞生长载体,每升培养基可加入25克微载体,连续培养,连续收获。此方法比较前一种虽然有改进,但在生物反应器上要配细胞沉降系统,而且微载体最多只能重复使用两次,设备投资较大,生产过程中耗材成本较高。
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首先把这种病毒的DNA找出来,确定一下在其DNA上与该病毒抗原形成有关的基因是哪个固定为目的基因,然后通过基因工程的方法首先制备出基因表达载体出来,再把该基因表达载体转入受体细胞内,经过目的基因的检测和鉴定步骤,确定转入成功。
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乙肝疫苗是抗原,而B淋巴细胞制造的是抗体。抗体是与抗原相结合的,是用来对付含有抗原的病原体的。基因工程乙肝疫苗是通过构建含有乙肝表面抗原基因的重组质粒,然后转染(就是让质粒进入宿主细胞)相应的宿主细胞,如酵母、CHO细胞( 中国仓鼠卵巢细胞,一种可以无限繁殖的细胞),生产乙肝表面抗原蛋白。
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