离子交换层析法原理是什么

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邗云德鄢风
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离子交换层析法
(ion
exchange
chromatography,简称IEC)是从复杂的混合物中,分离性质相似大分子的方法之一,依据的原理是物质的酸碱性、极性,也就是所带阴阳离子的不同。电荷不同的物质,对管柱上的离子交换剂有不同的亲和力,改变冲洗液的离子强度和pH值,物质就能依次从层析柱中分离出来。
离子交换层析法大致分为5个步骤:
1.
离子扩散到树脂表面。
2.
离子通过树脂扩散到交换位置。
3.
在交换位置进行离子交换;被交换的分子所带电荷愈多,它与树脂的结合愈紧密,也就愈不容易被其它离子取代。
4.
被交换的离子扩散到树脂表面。
5.
冲洗液通过,被交换的离子扩散到外部溶液中。
离子交换树脂的交换反应是可逆的,遵循化学平衡的规律,定量的混合物通过管柱时,离子不断被交换,浓度逐渐降低,几乎全部都能被吸附在树脂上;在冲洗的过程中,由于连续添加新的交换溶液,所以会朝正反应方向移动,因而可以把树脂上的离子冲洗下来。
如果被纯化的物质是氨基酸类的分子,则分子上的净电荷取决于氨基酸的等电点和溶液的pH值,所以当溶液的pH
值较低,氨基酸分子带正电荷,它将结合到强酸性的阳离子交换树脂上;随着通过的缓冲液pH逐渐增加,氨基酸将逐渐失去正电荷,结合力减弱,最后被洗下来。由于不同的氨基酸等电点不同,这些氨基酸将依次被洗出,最先被洗出的是酸性氨基酸,如apartic
acid和glutamic
acid(在约pH3~4时),随后是中性氨基酸,如glycine和alanine。碱性氨基酸如arginine和lysine在pH值很高的缓冲液中仍带有正电荷,因此这些在约pH值高达10~11时才出现。
利穗科技
2024-04-23 广告
连续流层析系统是一种高效的分离纯化技术,它利用层析原理,在连续流动的条件下对混合物进行分离和纯化。该系统具有分离效率高、操作简便、自动化程度高等特点,适用于生物医药、食品工业等领域。在连续流层析系统中,混合物通过特定的层析柱,在柱内的填料上... 点击进入详情页
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公叔恭漫歌
2020-02-14 · TA获得超过3.7万个赞
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离子交换层析原理:是以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别,而进行分离的一种层析方法。
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环时芳纵戊
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是以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别,而进行分离的一种层析方法
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秒懂百科
2021-01-03 · TA获得超过5.9万个赞
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