Question

血球计数板的作用是什么？

Answer 1

（1）构造：血球计数板是一块特制的载玻片，它的上表面有4条下凹的槽，构成3个平台，中间的平台又被一短横槽隔为两半，每半边各有一个方格网，每个方格网上有9个大小相等的大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室，供微生物计数用，这一大方格的长和宽各为1mm，深度为0.1mm，其体积为0.1mm3。

（2）规格：

一种是大方格内分为25中方格，每一中格又分为16小方格；另一种是大方格内分为16中方格，每一中方格又分为25小方格。但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同的特点，即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成，见图：

（3）使用方法

①取清洁干燥的血球计数板，加盖玻片盖住网格和两边的槽。

②将待测菌液充分摇匀后，用无菌吸管吸少许，由盖玻片边缘或槽内加入计数板，使其自行渗入计数室内，计数室内不能有气泡。静置5-10分钟。

③在低倍镜下找到小方格网后更换高倍镜观察计数，上下调动细螺旋，以便看到小室内不同深度的菌体。位于分格线上的菌体，只数两条边上的，其余两边不计数。即数上线就不数下线，数左边线就不数右边线。

④计数时，若使用刻度为25中方格×16小方格的计数板，计数四个角的4个中方格，及中央1个中方格的菌数（即80小方格）；若使用刻度为16中方格×25小方格的计数板，就数四个角的4个中方格（即100小方格）内的菌数。每小方格中菌数以5-10个为宜，如菌液过浓可适当稀释。

⑤每个样品重复计数2-3次，取其平均值，按下式计算样品中的菌数。

刻度为25中方格×16小方格的计数板：

刻度为16中方格×25小方格的计数板：

 

⑥试验结束后要清洗和整理试验用具，特别注意血球计数板不能用试管刷蘸洗涤剂擦洗，正确的做法是浸泡和冲洗，洗后自行晾干或用吹风机吹干。通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物，若不干净，则必须重复清洗直到干净为止。