Question

PcR为什么是第三轮才获得目的基因

Answer 1

原因如下：

一般需要获得的基因是有一定长度的，而模板长度很长。设计的引物决定了扩增产物的长度。第一个循环，引物与模板互补，此时变成两个模板，但因为模板很长，没有什么终止扩增，所以第一个循环扩增出来的新片段很长很长。

第二个循环以新的长片段为模板进行，但新片段的一端是引物开头的，所以第二个循环得到的片段就是我们需要的长度，但只是一条链，所以还不能分离出目的基因。

第三个循环：当以第二个循环得到的新片段为模板时，因为这个片段的长度就是需要扩增的长度，所以当第三个循环完成时，这个片段是需要的长度，且是双链DNA，这就得到了需要的目的基因了。所以至少要3个循环才能分离出目的基因。

扩展资料

PCR的每个循环过程包括高温变性、低温退火、中温延伸三个不同的事件：

①变性：加热使模板DNA在高温下（94℃左右）双链间的氢键断裂而形成两条单链；

②退火；使溶液温度降至50~60℃，模板DNA与引物按碱基配对原则互补结合；

③延伸：溶液反应温度升至72℃，耐热DNA聚合酶以单链DNA为模板，在引物的引导下，利用反应混合物中的4种脱氧核苷三磷酸（dNTP），按5'一3’方向复制出互补DNA。

参考资料来源：

百度百科——聚合酶链式反应