什么叫培养基?液体培养基和固体培养基在细菌检验中的应用如何?
2015-02-12
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动物细胞的培养对营养的要求较高,往往需要多种氨基酸、维生素、辅酶、核酸、嘌呤、嘧啶、激素和生长因子等,其中很多成分系用血清、胚胎浸出液等提供,在很多情况下还需加入10%的胎牛或新生牛血清。血清是一种很好的营养物质,绝大多数细胞在含有胎牛或新生牛血清的培养基中生长得最好,但它的来源比较困难,而且它的成分不确定,使得生长过程不易检测控制。任何血清使用前必须经过鉴定,只有无菌、无内毒素、无溶血或低溶血、 蛋白质以及营养素达一定标准以上的血清才能使用。有的细胞,能在无血清培养基中生长。用渐适法可使本来需要血清的细胞适应于在无血清培养基中生长。
动物细胞培养的另一个突出特点,是对环境条件要求严格。所以对这些条件严加控制,可以大幅度促进生长。例如,二倍体成纤维细胞在控制pH的情况下,比在可变pH的情况下生长得好得多。另一方面,动物细胞生长缓慢,它们对环境的影响又比微生物为大,因此常用空气、氧、二氧化碳和氮的混合气体进行供氧和调节pH。这不仅增加了培养的代价,也给过程的检测控制带来了困难。动物细胞培养还需要防治污染问题,细菌、真菌、病毒或细胞均可致动物细胞培养物的污染。而生物的组织材料、操作者自身、培养基、各种器皿以至环境均可引起污染。显著污染的标志是培养基pH值迅速改变,外形模糊,甚至出现漂浮的集落。 污染通常表明操作者技术上的失误或设备及用具出了毛病,特别是小牛血清的支原体污染及组织材料的污染问题更难以对付。
动物细胞培养中,还发现了一个有趣的现象,即大多数哺乳动物细胞是必须附壁即附着在固体表面生长,当细胞布满表面后即停止生长,这时若取走一片细胞,存留在表面上的细胞就会沿着表面生长而重新布满创面。从生长表面脱落进入液体的细胞通常不再生长而逐渐退化,这种细胞的培养称为单层附壁培养。附壁培养的细胞可用胰蛋白酶、酸、碱等试剂或机械方法处理,使之从生长表面上脱落下来。
基于上述原因,我想液体培养基更能满足动物细胞的培养条件吧!当然动物细胞也可以用固体养基培养,比如,最初科学家进行的动物细胞培养,就是将一些神经细胞放在凝固的鸡胚上培养的。
动物细胞培养的另一个突出特点,是对环境条件要求严格。所以对这些条件严加控制,可以大幅度促进生长。例如,二倍体成纤维细胞在控制pH的情况下,比在可变pH的情况下生长得好得多。另一方面,动物细胞生长缓慢,它们对环境的影响又比微生物为大,因此常用空气、氧、二氧化碳和氮的混合气体进行供氧和调节pH。这不仅增加了培养的代价,也给过程的检测控制带来了困难。动物细胞培养还需要防治污染问题,细菌、真菌、病毒或细胞均可致动物细胞培养物的污染。而生物的组织材料、操作者自身、培养基、各种器皿以至环境均可引起污染。显著污染的标志是培养基pH值迅速改变,外形模糊,甚至出现漂浮的集落。 污染通常表明操作者技术上的失误或设备及用具出了毛病,特别是小牛血清的支原体污染及组织材料的污染问题更难以对付。
动物细胞培养中,还发现了一个有趣的现象,即大多数哺乳动物细胞是必须附壁即附着在固体表面生长,当细胞布满表面后即停止生长,这时若取走一片细胞,存留在表面上的细胞就会沿着表面生长而重新布满创面。从生长表面脱落进入液体的细胞通常不再生长而逐渐退化,这种细胞的培养称为单层附壁培养。附壁培养的细胞可用胰蛋白酶、酸、碱等试剂或机械方法处理,使之从生长表面上脱落下来。
基于上述原因,我想液体培养基更能满足动物细胞的培养条件吧!当然动物细胞也可以用固体养基培养,比如,最初科学家进行的动物细胞培养,就是将一些神经细胞放在凝固的鸡胚上培养的。
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