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免疫组化中用到的post primary是什么意思

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Answer 1

　　免疫组化概念
　　应用免疫基本原理——抗原抗体反应即抗原与抗体特异性结合原理通化反应使标记抗体显色剂 (荧光素、酶、金属离、同位素) 显色确定组织细胞内抗原(肽蛋白质)其进行定位、定性及定量研究称免疫组织化技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化技术(immunocytochemistry)
　　[编辑本段]●免疫组化类
　　免疫组织化技术按照标记物种类免疫荧光、免疫酶、免疫铁蛋白、免疫金及放射免疫自影等
　　[编辑本段]●免疫组化实验所用组织细胞标本
　　实验所用主要组织标本细胞标本两类前者包括石蜡切片（病理片组织芯片）冰冻切片者包括组织印片、细胞爬片细胞涂片
　　其石蜡切片制作组织标本用、基本于组织形态保存且能作连续切片利于各种染色照观察；能期存档供顾性研究；石蜡切片制作程组织内抗原暴露定影响进行抗原修复免疫组化首选组织标本制作
　　[编辑本段]●免疫组化实验所用抗体
　　免疫组化实验用抗体单克隆抗体克隆抗体单克隆抗体B淋巴细胞克隆泌抗体应用细胞融合杂交瘤技术免疫物制备克隆抗体纯化抗原直接免疫物物血所获免疫血清B淋巴细胞克隆所产抗体混合物
　　●免疫组化用染色
　　根据标记物同免疫荧光免疫酶标亲组织化者种物质某种组织具高度亲合力基础检测种敏性更高利于微量抗原(抗体)细胞或亚细胞水平定位其物素—抗物素染色用
　　[编辑本段]●免疫组化操作步骤
　　 免疫组化（ LP ）操作步骤 ：
　　1． 切片规脱蜡至水需抗原修复步进行
　　2. 缓冲液洗 3min/2
　　3. 降低内源性氧化物酶造非特异性背景染色 , 切片放 Hydrogen Peroxide Block 孵育 10-15 钟
　　4. 缓冲液洗 5min/2
　　5. 滴加 Ultra V Block 室温孵育 5 钟封闭非特异性背景染色
　　（注：孵育要超 10 钟否则导致特异性染色降低抗稀释液含 5 － 10% 羊血清步省略）
　　6. 缓冲液洗 5min/2
　　7. 滴加抗工作液 37 ℃孵育 1 － 2 （具体孵育间温度由试验者终决定）
　　8. 缓冲液洗 5min/2
　　9 ． 滴加 Primary Antibody Enhancer( 增强 ) , 室温孵育 20 钟
　　10 ．缓冲液洗 5min/2
　　11 ．滴加 HRP Polymer( 酶标二抗 ) 室温孵育 30 钟
　　（注： HRP Polymer 光敏应避免必要光暴露并储存透明瓶）
　　12 ．缓冲液洗 5min/2
　　13 ．向 1ml DAB Plus Substrate ( 或 AEC Plus Substrate) 滴加 1-2 滴 DAB Plus Chromogen （或 AEC Plus Chromogen ） , 混匀滴加切片孵育 3 － 15 钟（具体间由染色深浅决定）
　　14 ．自水充冲洗 , 复染脱水 , 透明 , 封片
　　二．免疫组化 ( 三步 ) 操作步骤 ：
　　（ 1 ）、石蜡切片脱蜡至水
　　（ 2 ）、 3%H 2 O 2 室温孵育 5-10 钟消除内源性氧化物酶性
　　（ 3 ）、蒸馏水冲洗 PBS 浸泡 5 钟 x2 （需抗原修复步进行）
　　（ 4 ）、 5-10% 山羊血清（ PBS 稀释）封闭室温孵育 10 钟倾血清勿洗滴加 抗 工作液 37 ℃ 孵育 1-2 或 4 ℃ 夜
　　（ 5 ）、 PBS 冲洗 5 钟 x3
　　（ 6 ）、滴加适量 物素标记二抗 工作液 37 ℃ 孵育 10-30 钟
　　（ 7 ）、 PBS 冲洗 5 钟 x3
　　（ 8 ）、滴加适量 辣根酶或碱性磷酸酶标记链霉卵白素 工作液 37 ℃ 孵育 10-30 钟
　　（ 9 ）、 PBS 冲洗 5 钟 x3
　　（ 10 ）、显色剂显色 3-15 钟（ DAB 或 NBT/BCIP ）
　　（ 11 ）、自水充冲洗复染脱水透明封片
　　三. 冰冻切片免疫组化染色步骤：
　　冰冻切片 4-8um 室温放置 30 钟入 4 ℃丙酮固定 10钟PBS洗5钟x3用氧化氢孵育5-10钟消除内源性氧化物酶性
　　[编辑本段]●免疫组化实验结判定析
　　实验结言免疫组化技术服务主要涉及抗体实验结描述与析图片确定与选取相关数据提供述工作免疫组化工作重点内容严格实验设计标准实验操作专业化结析才能更满足客户要求点于形式腹水清培养液类抗体显更重要关于述服务内容应该实验始前由双明确般言客户实验前应提需要结与析例简要详细描述实验结需要实验数据否图片数量与规格等双盲试验或第三参与则事先申明
　　[编辑本段]●免疫组化临床工作意义
　　近随着免疫组织化技术发展各种特异性抗体现使许疑难肿瘤明确诊断规肿瘤病理诊断5%-10%病例单靠H.E.染色难作明确形态诊断尤其免疫组化肿瘤诊断鉴别诊断实用价值受普遍认其低化或未化肿瘤鉴别诊断准确率达50%-75%
　　免疫组织化临床应用主要包括几面：
　　(1)恶性肿瘤诊断与鉴别诊断；
　　(2)确定转移性恶性肿瘤原发部位；
　　(3)某类肿瘤进行进步病理型；
　　（4）软组织肿瘤治疗般需根据确组织类其种类、组织形态相像难区其组织源应用种标志进行免疫组化研究软组织肿瘤诊断缺少；
　　（5）发现微转移灶助于临床治疗案确定包括手术范围确定
　　（6）临床提供治疗案选择