Question

检测蛋白质用什么试剂

Answer 1

检测蛋白质用：双缩脲试剂。

双缩脲试剂是一种用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。它是一种碱性的含铜试液，呈蓝色，由0.1 g/mL氢氧化钠或氢氧化钾、0.01 g/mL硫酸铜和酒石酸钾钠配制而成。

双缩脲试剂本是用来检测双缩脲，由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。

当底物中含有肽键时，试液中的铜与多肽配位，络合物呈紫色。可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。

双缩脲试剂中真正起作用的是硫酸铜，而氢氧化钾仅仅是为了提供碱性环境，因此它可被其他碱，如氢氧化钠所代替。

向试剂中加入碘化钾，会延长试剂的使用寿命。酒石酸钾钠的作用是保护反应生成的络离子不被析出变为沉淀，从而使试剂失效。

血清蛋白测定(双缩脲法)试剂：球蛋白沉淀剂同上页酚试剂法。双缩脲试剂：硫酸铜(CuSO4·5H2O,三级试剂)1.5克，酒石酸钾钠(KNaC4H生O6·4H2O,三级试剂)6.0克2.5N氢氧化钠，300毫升，蒸馏水。

将硫酸铜及酒石酸分别各以200毫升蒸馏水溶解，必要时过滤，全部倾入1,000毫升容量瓶中，混匀。再加入氢氧化钠溶液并以蒸馏水稀释至1,000毫升刻度。分装塑料或内壁涂蜡的试剂瓶，加塞密封，于室温保存。若溶液中出现暗红色沉淀即不宜再用。