Question

求教测细胞周期的"同位素标记测定法"原理

Answer 1

1、 0.25%胰酶（无EDTA）消化，将细胞消化成单个。（必须消化成单个）。
2、离心收集细胞，弃上清，用预冷PBS洗细胞两次（加3ml，吹悬，离心，弃上清算洗一次）。
3、加入3ml预冷（-20度）70%乙醇到细胞沉淀中，于4度固定过夜（或者，如果实验周期长可以-20℃长期固定）。
4、离心收集细胞，以3mL的PBS洗细胞两次，加入500uLPBS含50ug/mL溴化乙锭（PI），100ug/mL RNase A， 0.2% Triton X-100， 4℃避光孵育30分钟。
5、送实验室，上机