科普下今幸人参皂苷的作用
品名
人参总皂苷
来源
本品为五加科植物人参的干燥根及根茎经加工制成的总皂苷。
制法
取人参,切成厚片,加水煎煮二次,第一次2小时,第二次1.5小时,煎液滤过,合并滤液,通过D101型大孔吸附树脂柱,水洗脱至无色,再用60%乙醇洗脱,收集60%乙醇洗脱液,滤液浓缩至相对密度为1.06~1.08(80℃)的清膏,干燥,粉碎,即得。
性状
本品为黄白色或淡黄色的粉末;微臭,味苦;具吸湿性。
本品在甲醇或乙醇中易溶,在水中溶解,在乙醚或石油醚中几乎不溶。
鉴别
(1)取本品0.1g,置试管中,加水2ml,用力振摇,产生持久性泡沫。
(2)取本品0.1g,加甲醇10ml使溶解,作为供试品溶液;另取人参对照药材1g,加水100ml煎煮2小时,滤过,滤液通过D101型大孔吸附树脂柱(内径为1cm,柱高为15cm),用水洗至无色,弃去水液,再用60%乙醇20ml洗脱,收集洗脱液,蒸于,残渣加甲醇10ml使溶解,作为对照药材溶液。再取人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Rg1对照品与人参皂苷Re对照品,加甲醇溶解制成每1ml各含2mg的混合溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(2010年版药典一部附录Ⅵ B)试验,吸取上述三种溶液各2μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷—乙酸乙酯-甲醇-水(15:40:22:10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,分别置日光和紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置,日光下显相同颜色的斑点,紫外光下显相同颜色的荧光斑点。
检查
粒度
依法检查(2010年版药典一部附录Ⅺ B第二法),能通过120目筛的粉末不少于95%。
干燥失重
取本品,在105℃干燥至恒重,减失重量不得过5.0%(2010年版药典一部附录ⅨG)
总灰分
不得过6.0%(2010年版药典一部附录Ⅸ K)。
炽灼残渣
不得过6.0%(2010年版药典一部附录Ⅸ J)。
重金属及有害元素
照铅、镉、砷、汞、铜测定法(2010年版药典一部附录Ⅸ B)测定,铅不得过百万分之三;镉不得过千万分之二;砷不得过百万分之二;汞不得过千万分之二;铜不得过百万分之二十。
有机氯农药残留量
照农药残留量测定法(2010年版药典一部附录Ⅸ Q有机氯农药残留测定)测定:六六六(总BHC)不得过千万分之一;滴滴涕(总DDT)不得过百万分之一;五氯硝基苯(PCNB)不得过千万分之一。
特征图谱
照高效液相色谱法(2010年版药典一部附录Ⅵ D)测定。
色谱条件与系统适用性试验
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(柱长为25cm,内径为4.6mm,粒径为5μm,载碳量11%);以乙腈为流动相A,以0.1%磷酸溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;柱温为30℃;流速为每分钟1.3 ml;检测波长为203nm。理论板数按人参皂苷Re峰计算应不低于6000,按人参皂苷Rd峰计算应不低于200000。
时间(分钟)
流动相A(%)
流动相B(%)
0~30
19
81
30~35
19 →24
81→ 76
35~60
24 → 40
76 →60
参照物溶液的制备
取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品和人参皂苷Rd对照品适量,精密称定,分别加甲醇制成每1ml含人参皂苷Rg1 0.3mg、人参皂苷Re 0.5mg和人参皂苷Rd 0.2mg的溶液,即得。
供试品溶液的制备
取本品30mg,精密称定,置10ml量瓶中,加甲醇超声处理使溶解并稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法
分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
供试品特征图谱中应呈现7个特征峰,其中3个峰应分别与相应的参照物峰保留时间相同;与人参皂苷Rd参照物峰相应的峰为S峰,计算特征峰3~7的相对保留时间,其相对保留时间应在规定值的±5%之内,规定值为:0.84(峰3)、0.91(峰4)、0.93(峰5)、0.95(峰6)、1.00(峰7)。
对照特征图谱
峰1:人参皂苷Rg1 峰2:人参皂苷Re 峰3:人参皂苷Rf 峰4:人参皂苷Rb1 峰5:人参皂Re 峰6:人参皂苷Rb2 峰7(S):人参皂苷Rd
含量测定
对照品溶液的制备
取人参皂苷Re对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,即得。
标准曲线的制备
精密吸取对照品溶液20μl、40μl、80μl、120μl、160μl、200μl,分别置于具塞试管中,低温挥去溶剂,加入1%香草醛高氯酸试液0.5ml,置60℃恒温水浴上充分混匀后加热15分钟,立即用冰水冷却2分钟,加入77%硫酸溶液5ml,摇匀;以试剂作空白。消除气泡后照紫外可见分光光度法(2010年版药典一部附录Ⅴ A),在540nm的波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标绘制标准曲线。
测定法
取本品约50mg,精密称定,置25ml量瓶中,加甲醇适量使溶解并稀释至刻度,摇匀,精密吸取50μl,照标准曲线的制备项下的方法,自“置于具塞试管中”起依法操作,测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中人参皂苷Re的量,计算结果乘以0.84,即得。
本品按干燥品计,含人参总皂苷以人参皂苷Re(C48H82O18)计,应为65%~85%。
人参皂苷Rg1、Re、Rd
照高效液相色谱法(2010年版药典一部附录Ⅵ D)测定。
色谱条件与系统适用性试验
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以0.1%磷酸溶液为流动相B,按[特征图谱]项表中梯度进行洗脱;检测波长为203nm。理论板数按人参皂苷Re峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备
取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品和人参皂苷Rd对照品适量,精密称定,加甲醇制成1ml中含人参皂苷Rg1 0.30mg,人参皂苷Re 0.50mg和人参皂苷Rd 0.20mg的混合溶液。
供试品溶液的制备
取[特征图谱]项下的供试品溶液,即得。
测定法
分别精密吸取供试晶溶液10~20μl与对照品溶液20μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品按干燥品计算,含人参皂苷Rg1(C42H72O14)、人参皂苷Re(C48H82O18)和人参皂苷Rd(C48H82O18)的总量计,应为15%~25%。
贮藏
密闭,置干燥处。
出处
《中华人民共和国药典》2010年版
近年来有关人参及其皂苷抗肿瘤作用的研究表明对肿瘤细胞具有抑制生长、诱导分化等作用。
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