为什么要两种酶才能切割基因（两端要不同的限制酶），不能是同一种吗？
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切割目的基因时同种序列当然可以用同种限制酶切割；但有时也用不同种的限制性酶割。
用不同限制酶切割的目的是：保证目的基因和质粒（运载体）的准确连接，避免无效连接过多。可以用不同限制酶切割相同序列的原理：
虽然一种限制酶只能识别一种特定的氨基酸序列，但两种限制酶识别的序列可以相包含，例：酶A识别GGATCC序列，酶B识别GATC序列，则GGATCC序列就可以被两种限制酶切割。
同步双酶切
同步双酶切选择能让两种酶同时作用的最佳缓冲液是非常重要的一步。NEB每一种酶都随酶提供相应的最佳NEBuffer，以保证100%的酶活性。NEBuffer的组成及内切酶在不同缓冲液中的活性见《内切酶在不同缓冲液里的活性表》及每支酶的说明书。
能在最大程度上保证两种酶活性的缓冲液即可用于双酶切。由于内切酶在非最佳缓冲液条件下的切割速率会减缓，因此使用时可根据每种酶在非最优缓冲液中的具体活性相应调整酶量和反应时间。
以上内容参考：百度百科-酶切技术
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知禾
2024-08-13 广告
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切割目的基因时同种序列当然可以用同种限制酶切割；但有时也用不同种的限制性酶割。
用不同限制酶切割的目的是：保证目的基因和质粒（运载体）的准确连接，避免无效连接（如：目的基因—目的基因连接物、质粒自身环化等）过多。可以用不同限制酶切割相同序列的原理：
虽然一种限制酶只能识别一种特定的氨基酸序列，但两种限制酶识别的序列可以相包含，例：酶A识别GGATCC序列，酶B识别GATC序列，则GGATCC序列就可以被两种限制酶切割。哪里不明白请追问，满意请采纳，希望对你有帮助~
用不同限制酶切割的目的是：保证目的基因和质粒（运载体）的准确连接，避免无效连接（如：目的基因—目的基因连接物、质粒自身环化等）过多。可以用不同限制酶切割相同序列的原理：
虽然一种限制酶只能识别一种特定的氨基酸序列，但两种限制酶识别的序列可以相包含，例：酶A识别GGATCC序列，酶B识别GATC序列，则GGATCC序列就可以被两种限制酶切割。哪里不明白请追问，满意请采纳，希望对你有帮助~
追问
目的“保证目的基因和质粒（运载体）的准确连接，避免无效连接”这段话能具体一点吗？我不明白
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