为什么蛋白质处于等电点时溶解度最低
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在等电点时,蛋白质分子以两性离子形式存在,其分子净电荷为零(即正负电荷相等),此时蛋白质分子颗粒在溶液中因没有相同电荷的相互排斥,分子相互之间的作用力减弱,其颗粒极易碰撞、凝聚而产生沉淀,所以蛋白质在等电点时,其溶解度最小,最易形成沉淀物,重组蛋白纯化服务、酵母蛋白纯化等粗提都是利用这个原理。
等电点沉淀主要应用于蛋白质等两性电解质的分离提纯,还可应用于大豆异黄酮的分离:用等电点沉淀法脱去蛋白质,可提高异黄酮制品的纯度,异黄酮截留率为7.2%,蛋白质截留率为91.1%。
大豆蛋白质在pH4.5左右达到等电点,此时其溶解度最低形成沉淀,利用这个性质来提取大豆分离蛋白,使大豆分离蛋白从提取液中聚沉下来,与其他可溶性物质分离。大豆分离蛋白不是在所有酸性条件下都沉淀,只有在等电点附近才沉淀,当pH调太低时溶解度反而升高,到pH2.5时,已沉淀的蛋白质就会几乎全部重新溶解,因此必须严格掌握酸沉所需的pH,才能有满意的效果。在分离中,大量的含磷化合物的存在是影响蛋白质提取的较大因素,最好除去植酸,可用透析法,也可根据蛋白质和植酸的溶解度的差异性将其除去。
等电点沉淀主要应用于蛋白质等两性电解质的分离提纯,还可应用于大豆异黄酮的分离:用等电点沉淀法脱去蛋白质,可提高异黄酮制品的纯度,异黄酮截留率为7.2%,蛋白质截留率为91.1%。
大豆蛋白质在pH4.5左右达到等电点,此时其溶解度最低形成沉淀,利用这个性质来提取大豆分离蛋白,使大豆分离蛋白从提取液中聚沉下来,与其他可溶性物质分离。大豆分离蛋白不是在所有酸性条件下都沉淀,只有在等电点附近才沉淀,当pH调太低时溶解度反而升高,到pH2.5时,已沉淀的蛋白质就会几乎全部重新溶解,因此必须严格掌握酸沉所需的pH,才能有满意的效果。在分离中,大量的含磷化合物的存在是影响蛋白质提取的较大因素,最好除去植酸,可用透析法,也可根据蛋白质和植酸的溶解度的差异性将其除去。
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