Question

PCR中正向引物和反向引物的概念和具体作用？

正向引物指什么？反向引物指什么？
一般来说DNA的合成不都是从5'-3’方向合成的吗?这样的话要反向引物做什么？

Answer 1

正向引物和反向引物是相对的，通常以一个双链DNA（上面的那条链）的上游结合部位称为正向引物，是从左到右的方向，也就是5-3的方向，而下面那条互补链的下游结合部位称为反向引物。

其方向是从右到左的，因为下面的链的方面从左到右是3-5，从右到左就是5-3了，PCR的扩增的确是一条引物就可以扩增了。

反向引物的存在可以结合互补链，使互补链的扩增方向也是5-3，这样一次就是两条链同时扩增，循环一次就是4条链同时扩增再循环一次就是8条链同时扩增，这样才是所谓的几何级数扩增。

正向合成时延伸到反向引物结合位点时就会停止，同理反向引物也是。

扩展资料：

PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段，使其能有效地扩增模板DNA序列。因此，引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。  

因为在同一PCR反应中，是用一个退火温度的，为了保证目的片段两端的引物都能与模板配对互搭，所以在设计引物时，尽量使两个引物的Tm值不要差别太大。

一般引物长度为15~30碱基，扩增片段长度为100~600碱基对。 一般引物序列中G+C含量一般为40%~60%。而且四种碱基的分布最好随机。 同时引物之间也不能有互补性，一般一对引物间不应多于4个连续碱基的互补。 

引物确定以后，可以对引物进行必要的修饰，例如可以在引物的5′端加酶切位点序列；标记生物素、荧光素、地高辛等，这对扩增的特异性影响不大。但3′端绝对不能进行任何修饰，因为引物的延伸是从3′端开始的。

还需提醒的是3′端不要终止于密码子的第3位，因为密码子第3位易发生简并，会影响扩增的特异性与效率。

参考资料来源：百度百科——聚合酶链式反应  

参考资料来源：百度百科——引物

参考资料来源：百度百科——反向引物

Answer 2

正向引物和反向引物是相对的
通常以一个双链DNA（上面的那条链）的上游结合部位称为正向引物
是从左到右的方向，也就是5-3的方向
而下面那条互补链的下游结合部位称为反向引物
其方向是从右到左的
因为下面的链的方面从左到右是3-5
从右到左就是5-3了
PCR的扩增的确是一条引物就可以扩增了
反向引物的存在可以结合互补链
使互补链的扩增方向也是5-3
这样一次就是两条链同时扩增
循环一次就是4条链同时扩增
再循环一次就是8条链同时扩增
这样才是所谓的几何级数扩增
正向合成时延伸到反向引物结合位点时就会停止
同理反向引物也是

Answer 3

正向跟反向就是所谓的上下游引物.如果没有下幼引物那你扩增出来的片段就是你的正向引物的位置一直到你的序列结束,而且基本上扩不出来

Answer 4

没有反向引物，难道正向引物无限制合成下去吗？一条pcr条带需要两端两条引物对向walking才能合成。