PCR循环次数是否越多越好?为什么
2022-09-28 · 百度认证:北京惠企网络技术有限公司官方账号
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当然不是越多越好。
循环次数过多,并不会计产物也随之过度增加。因为再次循环都有高温到低的温度变化,聚合酶的活性有限,而且一般体系中引物和原料的量也不会是无限供应的。
另外循环次数过多,产物间可能会形成较为复杂的结构,影响其作为模板的效率,因此循环次数不是越多越好,一般PCR反应的循环不超过35次。
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PCR的原理
PCR是聚合酶链式反应的简称,是体外快速扩增特定基因或DNA序列最为常用的方法之一。具体过程是将双链DNA分子在临近沸点的温度下加热分离成两条单链DNA分子,DNA聚合酶以单链DNA为模板并利用反应混合系中的四种脱氧核苷酸合成新生的DNA互补链。重复这一过程便可使目的DNA片段得到大规模扩增。
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