Question

马铃薯基因测序过程中存在的难题不包括

Answer 1

马铃薯基因测序过程中存在的难题不包括测序技术准确度低。

一、随着马铃薯的全基因组测序完成，这为了解基因功能和通过植物遗传转化操作来改善这一重要作物带来了广泛的可能性。农杆菌介导的遗传转化是用于马铃薯功能基因组研究，以及将新性状引入商业马铃薯品种，同时保留所需性状组合的最常用技术。

二、基因测序过程：

1、用三种马铃薯使用茎段作为外植体的遗传转化方案。用带有双元载体pBI121的根癌农杆菌菌株AGL1侵染预培养的茎段外植体并将基因转入植物细胞中。共培养后，在含卡那霉素（伯远严选#RJG00）的愈伤组织诱导培养基（CIM）上，选择被侵染的茎段外植体。

2、筛选出的愈伤组织在芽诱导培养基（SIM）上会再生出转基因植物。从外植体准备到获得转基因植物的过程大约需要90天。平均转化率（定义为PCR阳性转基因植物的数量/使用的外植体总数）分别为35%、22%和65%。

3、培养基选用：愈伤组织、芽再生和生根培养基。用1MKOH将所有植物培养基的pH值调节至5.8，并进行高压灭菌。在高压灭菌前添加激素，但在高压灭菌后，当培养基温度降至55℃时，添加玉米素和所有抗生素。所有培养基都可以在4℃下储存数周。