试述化学发光免疫分析的基本原理及其类型,其与荧光的根本区别是什么?
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(1)化学发光免疫分析是以发光物质作为标记物,在反应体系中发光物质在碱性介质中氧化时释放大量自由能,产生激发态的中间体,该激发态的中间体由最低振动能级回到稳定的基态、各个振动能级时产生辐射,同时产生能量,多余的能量即为发射光子,从而产生发光现象。利用发光信号的测量仪器,分析接收的光量子产额,通过计算机系统转换成被测物质的浓度单位。
(2)化学发光免疫分析的类型:①根据所采用的标记物的不同可分为发光物标记、酶标记、元素标记化学发光免疫分析;②根据所采用的发光反应的体系不同和标记物的不同分为:化学发光免疫分析、化学发光酶免疫分析、微粒子化学发光免疫分析、电化学发光免疫分析。
(3)化学发光反应系统中以化学反应为基础,化学发光的首要条件是吸收了化学能而处于激发态的分子或原子必须能释放出光子或者能将能量转移到另一个物质的分子上并使这种分子激发,当这种分子回到基态时释放出光子。化学发光与荧光的根本区别是形成激发态分子的激发能原理不同。荧光是发光物质吸收了激发光后使分子产生发射光,化学发光是化学反应过程中所产生的化学能使分子激发产生的发射光。因此,化学发光反应中反应过程必须产生足够的激发能是产生发光效应的重要条件。
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