什么是western blot?有什么用途?
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【答案】:Western blot依据的基本原理有两个:蛋白质的凝胶电泳分离和抗原一抗体间的特异结合。
Western blot就是蛋白质免疫印迹。将经过凝胶电泳分离的蛋白质条带,原位电转移至能吸附蛋白质且有一定机械性能的薄膜(如醋酸纤维素膜)上,然后分别与目标蛋白质的特异抗体以及酶标二抗进行孵育结合,最好加入酶底物进行反应,使与抗体特异结合的蛋白质条带显色,从而使目标蛋白得到鉴定。
用途:(1)鉴定蛋白质样品中某种目标蛋白的存在与否(如果有显色条带,说明蛋白质样品中含有目标蛋白)。(2)鉴定抗体的特异性(如果在某一蛋白质混合样品中只有一条带显色,显示抗体具有特异性)。(3)结合标准蛋白的使用,可以鉴定目标蛋白的分子量和含量。
Western blot就是蛋白质免疫印迹。将经过凝胶电泳分离的蛋白质条带,原位电转移至能吸附蛋白质且有一定机械性能的薄膜(如醋酸纤维素膜)上,然后分别与目标蛋白质的特异抗体以及酶标二抗进行孵育结合,最好加入酶底物进行反应,使与抗体特异结合的蛋白质条带显色,从而使目标蛋白得到鉴定。
用途:(1)鉴定蛋白质样品中某种目标蛋白的存在与否(如果有显色条带,说明蛋白质样品中含有目标蛋白)。(2)鉴定抗体的特异性(如果在某一蛋白质混合样品中只有一条带显色,显示抗体具有特异性)。(3)结合标准蛋白的使用,可以鉴定目标蛋白的分子量和含量。
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