Question

一个高中生物问题

对于由基因突变而引起的遗传病，其根本原因是由于基因的碱基排列顺序发生了变化，检测突变基因必须使用的酶是（）
A。解旋酶 B。DNA连接酶 C。限制性内切酶 D。DNA聚合酶
请说明是什么原理，或什么过程。。

Answer 1

C
[解题过程]
首先这道题考点是选修本中的基因诊断，所谓的基因诊断就是用放射性同位素（如32P）、荧光分子等标记的DNA分子做探针，利用DNA分子杂交原理，鉴定被检测标本上的遗传信息，达到检测疾病的目的。而检测样本中是否存在与探针序列互补的同源核酸序列，常用以下方法。
（1）限制性内切酶分析法。 此方法是利用限制性内切酶和特异性DNA探针来检测是否存在基因变异。当待测DNA序列中发生突变时会导致某些限制性内切酶位点的改变，其特异的限制性酶切片段的状态在电泳迁移率上也会随之改变，借此可作出分析诊断。
（2）DNA限制性片断长度多态性分析。 在人类基因组中，平均约200对碱基可发生一对变异（称为中性突变），中性突变导致个体间核苷酸序列的差异，称为DNA多态性。不少DNA多态性发生在限制性内切酶识别位点上，酶解该DNA片段就会产生长度不同的片断，称为限制性片段长度多态性(RFLP)。RFLR按孟德尔方式遗传，在某一特定家族中，如果某一致病基因与特异的多态性片断紧密连锁，就可用这一多态性片段为一种“遗传标志”，来判断家庭成员或胎儿是否为致病基因的携带者。甲型血友病、囊性纤维病变和苯丙酮尿症等均可借助这一方法得到诊断。
（3）等位基因特异寡核苷酸探针杂交法。遗传疾病的遗传基础是基因序列中发生一种或多种突变。根据已知基因突变位点的核苷酸序列，人工合成两种寡核苷酸探针：一是相应于突变基因碱基序列的寡核苷酸；二是相应于正常基因碱基序的寡核苷酸，用它们分别与受检者DNA进行分子杂交。从而检测受检者基因是否发生突变，以及是否有新的突变类型。

根据题意，可用第一种或第二种方法，因此检测过程中必须用到限制性内切酶。但事实上这道题失分相当严重，高考后我简单统计一下，一个成绩中等的班级总人数为41人，选正确C答案的只有6个，绝大多数学生错选A，而错选A的学生其实思路主要考虑到DNA杂交技术，他们知道DNA杂交技术就是采用一定的技术手段，将两种生物的DNA的单链放在一起，如果这两个单链具有互补的碱基序列，那么，互补的碱基序列就会结合在一起，形成杂合双链区；在没有互补碱基序列的部位，仍然是两条游离的单链。DNA杂交中要用DNA单链，所以学生考虑到用解旋酶使DNA解旋成单链，但是学生忘记了只要把不同来源的DNA分别加热到100℃或调节pH到大于13时，双链DNA分子间的氢键就会断裂，就会变性解离成单链，因此实际中根本不需要解旋酶。

选C:限制性内切酶
限制性内切酶:一种在特殊核苷酸序列处水解双链DNA的内切酶。I型限制性内切酶既催化宿主DNA的甲基化，又催化非甲基化的DNA的水解；而II型限制性内切酶只催化非甲基化的DNA的水解

Answer 2

选D。
可以通过多聚酶链式反应扩增待检测基因后与正常基因序列进行比对，观察是否存在差异从而确定基因的碱基排列顺序是否发生了改变。
多聚酶链式反应中必须用到DNA聚合酶。

Answer 3

A

Answer 4

A

由于基因的碱基排列顺序发生了变化，检测突变基因。就必须是双链DNA变为单链DNA在检测碱基顺序，因此就必须运用到 A解旋酶

Answer 5

检测突变基因要使用DNA分子杂交技术，必须运用到 A解旋酶

Answer 6

除了一楼，ls几个都在胡说八道。
什么乱七八糟的解旋酶，PCR过程中高温就可以让DNA解旋。 即便用到杂交，变性液也是氢氧化钠/氯化钠溶液，没什么解旋酶的事。

准确答案就是DNA聚合酶，利用的是PCR技术。