Question

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质的实验中，当分离胶加完之后为什么需要在上面加一层水？

Answer 1

加一层水称为水封\x0d\x0a目的是隔绝空气使催化反应快速进行，进而形成凝胶，还可使分离胶上沿平直。\x0d\x0a并且加水后，保持分离胶表面的平整性，使浓缩胶和分离胶都处于同一水平面上。\x0d\x0a\x0d\x0a甘氨酸是为了解离出甘氨酸根离子，甘氨酸根离子可以稳定的界面，使蛋白聚集在移动界面附近，浓缩在一起。\x0d\x0a\x0d\x0a样品液煮沸这个问题我个人认为是可以商榷的，因为理论上煮沸可以使SDS和蛋白更快更好的结合，以便于SDS-PAGE的进行。但是有些蛋白似乎不煮沸直接上样结果更好。对于非还原Loading buffer（即不含巯基乙醇）的样品，一般是不要煮沸的。\x0d\x0a\x0d\x0a长时间的电泳会使正极变酸，负极变碱。