Question

怎么确保RNA中的DNA被去掉

怎么确保RNA中的DNA被去掉？操作上怎么简单快速？使用 去DNA试剂盒 怎么样？还是用DNA酶？DNA酶有单卖的么？

Answer 1

如果你是新手，建议你操作严格一些，最好能养成严谨的实验习惯吧。
总RNA提取出来，变性胶电泳；
去除总RNA中残留的DNA，变性胶电泳检测是否有降解，及降解的程度，（如果你是要做PCR，尤其是qPCR，而且你的引物不是跨内含子的或者编码序列中没有内含子的，这一步是必需的）
再进行后续的实验。
总RNA去DNA，有试剂盒，也有单卖得，具体的操作根据你买来的试剂的说明书来，记得防止RNA酶的降解，需要用DEPC处理过的水。。。。。和你提取总RNA的时候一样小心对待。。。。
基本的反应体系如下：
总RNA
DNase 缓冲液
DNase
补DEPC处理过的水 到 一定的体系，

现在qPCR反应试剂盒里一般都有DNase的，按照说明书来进行操作

希望对你有帮助！

Answer 2

操作上？我从来没去过，都是用内含子引物PCR十几圈，看条带，（越亮DNA越多）
看着差不多就可以了，如果DNA过多是操作过失，技术问题。
DNA酶大多RNA试剂盒都赠一管，DNA酶本身也不便宜，可以单卖。
质量好的推荐invitrogen的，就是有点贵，全式金的也可以啊。
话说回来，不用盒子也毫无压力啊
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追问

加DNA酶处理的话，在哪个步骤加酶呢？我们的引物不跨外显子，需要去酶

追答

首先，加酶的话，这个问题不好说，我用过几家的，不一样，都附带说明书，看看就可以
不跨也可以啊，一对内含子的引物也可以啊。你是想看有没有DNA，不用跨外显子
如果你需要我给你一份invitrogen超级变态的盒子说明书，可以从四个大孢子母细胞提gRNA
其他相关事项就不提醒了，只要你操作规范，不会有DNA污染的
欢迎追问，求采纳

Answer 3

我用life technologies的DNAse I 还不错啊。他们既卖单品也卖试剂盒，可以根据你的需要咨询。但是酶消化完以后的失活或再提纯步骤很重要，不然可能影响下游的PCR反应。

Answer 4

DNA酶有单卖的。