原代细胞和传代细胞培养有哪些区别

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上海宇玫博生物科技有限公司 2023-08-27
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外泌体多数情况下,细胞在体外培养需要血清,但血清中含有外泌体,为了避免血清污染细胞产生的外泌体,一般采用2种方法:①细胞培养前,通过100000??g超速离心过夜,去除血清外泌体。②可选择无血清培养基进行培养。宇玫博生物正在免费提供外泌体提取试剂盒,数量有限,先申请先得。
刺任芹O
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原代细胞和传代细胞培养有含义、培养过程、培养结果和应用四个方面区别:

1、含义不同

原代培养是直接从生物体获取组织或器官的一部分进行培养,也称初代培养。原代培养是将培养物放置在体外生长环境中持续培养,中途不分割培养物的培养过程。有几方面含义:原代培养中的代并非细胞的代数,因为培养过程中细胞经多次分裂已经产生多代子细胞。

传代培养是指需要将培养物分割成小的部分,重新接种到另外的培养器皿(瓶)内,再进行培养的过程。

2、培养过程不同

原代培养的基本过程包括取材、培养材料的制备、接种、加培养液、置培养条件下培养等步骤,在所有的操作过程中,都必须保持培养物及生长环境的无菌。

传代培养时要注意无菌操作并防止细胞之间的交叉污染。所有操作要尽量靠近酒精灯火焰。每次最好只进行一种细胞的操作。取出长成单层的原代培养细胞,倒掉瓶内培养液,加入消化液。细胞变圆,相互之间不再连片时将消化液倒掉,加入新鲜培养液,吹打,制成细胞悬液。 

3、培养结果不同

原代培养细胞会分裂。原代培养的细胞一般传至10代左右就不容易传下去了,细胞的生长就会出现停滞,大部分细胞衰老死亡。细胞接种后一般几小时内就能贴壁,并开始生长,如接种的细胞密度适宜,5天到一周即可形成单层。

传代培养一般传到40到50代。一般情况,传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2到4天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代。

4、应用不同

原代细胞培养为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段,同时也为以后传代培养创造条件。利用此方法还可直接服务于临床实践。例如,用从手术中切除的肿瘤细胞进行原代培养,然后用该培养细胞进行抗癌药物的筛选,来帮助选择最有效的化疗方案。

传代培养主要应用在医学领域,如口腔医学领域重新构建结构复杂的牙根,还有改良羊水细胞培养技术,可多次获得有效地细胞克隆,大大提高培养成功率,增加了可分析核型数量,提高了产前诊断工作的质量和效益。

参考资料来源:百度百科-原代培养

参考资料来源:百度百科-传代培养

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