请问细菌细胞膜上的糖蛋白多吗?如果多的话一般都哪些糖蛋白?
请问细菌细胞膜上的糖蛋白多吗?如果多的话一般都哪些糖蛋白?我想用亲合层析法来纯化细胞膜上的神经氨酸酶,不知道能否纯化出来?...
请问细菌细胞膜上的糖蛋白多吗?如果多的话一般都哪些糖蛋白?
我想用亲合层析法来纯化细胞膜上的神经氨酸酶,不知道能否纯化出来? 展开
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我大学学的经济,可能知道的有限,只能给你点建议了``
糖蛋白的主要作用是细胞内外的物质交换,那么 我觉得它的多少和该细胞的作用有关,个人认为如果是分泌细胞它的糖蛋白含量应该就比较多,比如肝细胞,胰岛细胞,我觉得纯化的难度很大,首先,膜蛋白不是单一的蛋白种类,你可以看作它是一种蛋白集合,或者一个系统,有各种不同蛋白构成,而且,用亲和层析法来纯化的时候,你的 配体和载体如果选择不当,可能会将一些不属于细胞膜的蛋白质层析出来,这个要尤其注意
我有个小建议,因为毕竟不是我的专业,可能这个建议有点外行或者 无知,不过科学就是无限的猜想和实践过程嘛,不要见笑.我觉得 你若想得到细胞膜上的糖弹白,可以这样,
首先得到纯净的细胞膜,这个需要一个严谨的剥离洗净过程,犹豫糖弹白和磷脂双分子层之间的镶嵌应该不会那么轻易脱落的,这个过程 相对比较易行
然后分离,将除糖弹白以外的物质费解沉淀,用什么试剂和方法我确实还不知道``,不过我觉得有时候这样的逆向获取,更方便,也更加精确`
糖蛋白的主要作用是细胞内外的物质交换,那么 我觉得它的多少和该细胞的作用有关,个人认为如果是分泌细胞它的糖蛋白含量应该就比较多,比如肝细胞,胰岛细胞,我觉得纯化的难度很大,首先,膜蛋白不是单一的蛋白种类,你可以看作它是一种蛋白集合,或者一个系统,有各种不同蛋白构成,而且,用亲和层析法来纯化的时候,你的 配体和载体如果选择不当,可能会将一些不属于细胞膜的蛋白质层析出来,这个要尤其注意
我有个小建议,因为毕竟不是我的专业,可能这个建议有点外行或者 无知,不过科学就是无限的猜想和实践过程嘛,不要见笑.我觉得 你若想得到细胞膜上的糖弹白,可以这样,
首先得到纯净的细胞膜,这个需要一个严谨的剥离洗净过程,犹豫糖弹白和磷脂双分子层之间的镶嵌应该不会那么轻易脱落的,这个过程 相对比较易行
然后分离,将除糖弹白以外的物质费解沉淀,用什么试剂和方法我确实还不知道``,不过我觉得有时候这样的逆向获取,更方便,也更加精确`
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网上收了些
细胞膜的基本结构
(1)膜脂
磷脂、胆固醇、糖脂,每个动物细胞质膜上约有109个脂分子,即每平方微米的质膜上约有5x106个脂分子。
(2)膜蛋白
细胞膜蛋白质(包括酶)膜蛋白质主要以两种形式同膜脂质相结合:分内在蛋白和外在蛋白两种。内在蛋白以疏水的部分直接与磷脂的疏水部分共价结合,两端带有极性,贯穿膜的内外;外在蛋白以非共价键结合在固有蛋白的外端上,或结合在磷脂分子的亲水头上。如载体、特异受体、酶、表面抗原。占20%~30%的表面蛋白质(外周蛋白质)以带电的氨基酸或基团——极性基团与膜两侧的脂质结合;占70%~80%的结合蛋白质(内在蛋白质)通过一个或几个疏水的α-螺旋(20~30个疏水氨基酸吸收而形成,每圈3.6个氨基酸残基,相当于膜厚度。相邻的α-螺旋以膜内、外两侧直链肽连接)即膜内疏水羟基与脂质分子结合。理论上,镶嵌在脂质层中的蛋白质是可以横向漂浮移位的,因而该是随机分布的;可实际存在着的有区域性的分布;(这可能与膜内侧的细胞骨架存在对某种蛋白质分子局限作用有关),以实现其特殊的功能:细胞与环境的物质、能量和信息交换等。(Frye和Edidin1970年用发红光的碱性芯香红标记人细胞同用发绿光荧光素标记膜蛋白抗体标记离体培养的小鼠细胞一起培养,然后使它们融合,从各自分布,经过37℃40min后变为均匀分布。光致漂白荧光恢复法,微区监测)
细胞膜上存在两类主要的转运蛋白,即:载体蛋白(carrier protein)和通道蛋白(channel protein)。载体蛋白又称做载体(carrier)、通透酶(permease)和转运器(transporter),能够与特定溶质结合,通过自身构象的变化,将与它结合的溶质转移到膜的另一侧,载体蛋白有的需要能量驱动,如:各类APT驱动的离子泵;有的则不需要能量,以自由扩散的方式运输物质,如:缬氨酶素。通道蛋白与与所转运物质的结合较弱,它能形成亲水的通道,当通道打开时能允许特定的溶质通过,所有通道蛋白均以自由扩散的方式运输溶质。
(3)膜糖
膜糖和糖衣:糖蛋白、糖脂
细胞膜糖类主要是一些寡糖链和多糖链,它们都以共价键的形式和膜脂质或蛋白质结合,形成糖脂和糖蛋白;这些糖链绝大多数是裸露在膜的外面(非细胞质)一侧的。(多糖-蛋白质复合物,细胞外壳cell coat)单糖排序上的特异性作为细胞或蛋白质的“标志、天线”—抗原决定簇(可识别,与递质、激素等结合。ABO血型物质即鞘氨醇上寡糖链不同。131AA+100糖残基)。
细胞膜的基本特征与功能
细胞膜把细胞包裹起来,使细胞能够保持相对的稳定性,维持正常的生命活动。此外,细胞所必需的养分的吸收和代谢产物的排出都要通过细胞膜。所以,细胞膜的这种选择性的让某些分子进入或排出细胞的特性,叫做选择渗透性。这是细胞膜最基本的一种功能。如果细胞丧失了这种功能,细胞就会死亡.。
细胞膜除了通过选择性渗透来调节和控制细胞内,外的物质交换外,还能以"胞吞"和"胞吐"的方式,帮助细胞从外界环境中摄取液体小滴和捕获食物颗粒,供应细胞在生命活动中对营养物质的需求。细胞膜也能接收外界信号的刺激使细胞做出反应,从而调节细胞的生命活动。细胞膜不单是细胞的物理屏障,也是在细胞生命活动中有复杂功能的重要结构。
生物膜结构的共同特征:
镶嵌性:磷脂双分子层和蛋白质的镶嵌面;或按二维排成相互交替的镶嵌面;
蛋白质极性:膜内在性蛋白质的极性区突向膜表面,非极性部分埋在双层内部;
流动性:膜结构中的蛋白质和脂质具有相对侧向流动性;
相变性;随着环境条件的变化,脂质分子的晶态和液晶态是互变的;
更新态:在细胞中,膜的组分处于不断更新的状态;
不对称性:膜中各组分的排列是不对称的。
细胞膜的受体功能:受体是细胞识别和结核化学信息的特殊结构,其本质是蛋白质。
细胞膜的基本结构
(1)膜脂
磷脂、胆固醇、糖脂,每个动物细胞质膜上约有109个脂分子,即每平方微米的质膜上约有5x106个脂分子。
(2)膜蛋白
细胞膜蛋白质(包括酶)膜蛋白质主要以两种形式同膜脂质相结合:分内在蛋白和外在蛋白两种。内在蛋白以疏水的部分直接与磷脂的疏水部分共价结合,两端带有极性,贯穿膜的内外;外在蛋白以非共价键结合在固有蛋白的外端上,或结合在磷脂分子的亲水头上。如载体、特异受体、酶、表面抗原。占20%~30%的表面蛋白质(外周蛋白质)以带电的氨基酸或基团——极性基团与膜两侧的脂质结合;占70%~80%的结合蛋白质(内在蛋白质)通过一个或几个疏水的α-螺旋(20~30个疏水氨基酸吸收而形成,每圈3.6个氨基酸残基,相当于膜厚度。相邻的α-螺旋以膜内、外两侧直链肽连接)即膜内疏水羟基与脂质分子结合。理论上,镶嵌在脂质层中的蛋白质是可以横向漂浮移位的,因而该是随机分布的;可实际存在着的有区域性的分布;(这可能与膜内侧的细胞骨架存在对某种蛋白质分子局限作用有关),以实现其特殊的功能:细胞与环境的物质、能量和信息交换等。(Frye和Edidin1970年用发红光的碱性芯香红标记人细胞同用发绿光荧光素标记膜蛋白抗体标记离体培养的小鼠细胞一起培养,然后使它们融合,从各自分布,经过37℃40min后变为均匀分布。光致漂白荧光恢复法,微区监测)
细胞膜上存在两类主要的转运蛋白,即:载体蛋白(carrier protein)和通道蛋白(channel protein)。载体蛋白又称做载体(carrier)、通透酶(permease)和转运器(transporter),能够与特定溶质结合,通过自身构象的变化,将与它结合的溶质转移到膜的另一侧,载体蛋白有的需要能量驱动,如:各类APT驱动的离子泵;有的则不需要能量,以自由扩散的方式运输物质,如:缬氨酶素。通道蛋白与与所转运物质的结合较弱,它能形成亲水的通道,当通道打开时能允许特定的溶质通过,所有通道蛋白均以自由扩散的方式运输溶质。
(3)膜糖
膜糖和糖衣:糖蛋白、糖脂
细胞膜糖类主要是一些寡糖链和多糖链,它们都以共价键的形式和膜脂质或蛋白质结合,形成糖脂和糖蛋白;这些糖链绝大多数是裸露在膜的外面(非细胞质)一侧的。(多糖-蛋白质复合物,细胞外壳cell coat)单糖排序上的特异性作为细胞或蛋白质的“标志、天线”—抗原决定簇(可识别,与递质、激素等结合。ABO血型物质即鞘氨醇上寡糖链不同。131AA+100糖残基)。
细胞膜的基本特征与功能
细胞膜把细胞包裹起来,使细胞能够保持相对的稳定性,维持正常的生命活动。此外,细胞所必需的养分的吸收和代谢产物的排出都要通过细胞膜。所以,细胞膜的这种选择性的让某些分子进入或排出细胞的特性,叫做选择渗透性。这是细胞膜最基本的一种功能。如果细胞丧失了这种功能,细胞就会死亡.。
细胞膜除了通过选择性渗透来调节和控制细胞内,外的物质交换外,还能以"胞吞"和"胞吐"的方式,帮助细胞从外界环境中摄取液体小滴和捕获食物颗粒,供应细胞在生命活动中对营养物质的需求。细胞膜也能接收外界信号的刺激使细胞做出反应,从而调节细胞的生命活动。细胞膜不单是细胞的物理屏障,也是在细胞生命活动中有复杂功能的重要结构。
生物膜结构的共同特征:
镶嵌性:磷脂双分子层和蛋白质的镶嵌面;或按二维排成相互交替的镶嵌面;
蛋白质极性:膜内在性蛋白质的极性区突向膜表面,非极性部分埋在双层内部;
流动性:膜结构中的蛋白质和脂质具有相对侧向流动性;
相变性;随着环境条件的变化,脂质分子的晶态和液晶态是互变的;
更新态:在细胞中,膜的组分处于不断更新的状态;
不对称性:膜中各组分的排列是不对称的。
细胞膜的受体功能:受体是细胞识别和结核化学信息的特殊结构,其本质是蛋白质。
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