Question

影响花药培养的因素有哪些

Answer 1

花药培养是用植物组织培养技术，把发育到一定阶段的花药，通过无菌操作技术，接种在人工培养基上，以改变花药内花粉粒的发育程序，诱导其分化，并连续进行有丝分裂，形成细胞团，进而形成一团无分化的薄壁组织——愈伤组织，或分化成胚状体，随后使愈伤组织分化成完整的植株。影响花药培养的因素包括以下5个方面。
1、基本培养基
基本培养基的选择因植物种类和品种而异。MS培养基和H培养基适合双子叶植物花药培养；B5培养基适合豆科与十字花科植物花药培养；Nitsch培养基适合芸薹属和曼佗罗属植物花药培养；而禾谷类植物的花药培养常采用N6、C17和W14等培养基。

2、无机盐
培养基中高浓度的铵离子显著抑制花粉愈伤组织形成。铁盐对花粉胚状体发育很重要，如在Fe-EDTA浓度小于40μmol/L的低铁或无铁培养基上，烟草花粉胚只形成多细胞原胚体（球形胚）便停止发育。

3、生长调节剂
生长调节剂的种类与浓度对花粉的启动、分裂、分化具有关键的作用。细胞分裂素也椰汁促进花粉分化成胚状体，生长素类尤其2，4-D促进愈伤组织形成，但2，4-D抑制愈伤组织分化成胚状体。高浓度生长素甚至可引起茄科花粉胚状体转化为愈伤组织。因此，诱导愈伤组织分化成苗，应将其转入无2，4-D或含有低浓度IAA，NAA与较高浓度细胞分裂素的分化培养基上。烟草、水稻等少数植物的花药可在不含生长调节剂的培养基上形成愈伤组织或花粉胚。

4、蔗糖
蔗糖作为碳源和调节培养基渗透势的物质，其浓度对花粉愈伤组织诱导率有一定的影响，例如诱导油菜、烟草花粉愈伤组织或胚状体的适宜蔗糖浓度是2%-3%，水稻则是4%-8%，甘蔗则高达20%，但对大多数植物来说是2%-4%。在许多植物花药和花粉培养中，诱导花粉形成愈伤组织阶段，宜采用较高浓度蔗糖，而愈伤组织分化成苗阶段宜用较低浓度的蔗糖。

5、附加物
添加天然有机物如水解乳蛋白、水解酪蛋白、椰子汁、酵母提取液等，是对基本培养基组成成分和生长调节剂的补充，可提高花粉愈伤组织和胚状体诱导率，对促进其生长有良好的效果。此外，活性炭也能促进胚状体发育，提高花粉植株产量，且已经在烟草、油菜、马铃薯等植物中被先后证实。