琼脂糖凝胶电泳的原理是什么?
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琼脂糖凝胶电泳的原理:
琼脂糖凝胶具有网络结构,物质分子通过时会受到阻力,大分子物质在涌动时受到的阻力大,因此在凝胶电泳中,带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量,而且还取决于分子大小,这就大大提高了分辨能力。
DNA分子在高于其等电点的溶液中带负电,在电场中向阳极移动。在一定的电场强度下,DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应,即分子本身的大小和构型是主要的影响因素。DNA分子的迁移速度与其相对分子量成反比。
做琼脂糖凝胶电泳的注意事项:
1、Marker的选择
Marker的选择要适中,Marker应该选择在目标片段大小附近ladder较密的,这样对目标片段大小的估计才比较准确。如果marker太大就可能跑不开,挤到一起,起不到marker的作用。
2、煮胶要完全,胶要摇匀
注意煮胶完全,不然有小颗粒会影响跑胶结果。如果胶没有摇匀,跑胶的时候,相同的DNA的速度就不会相同,这样会出现弥散条带。
以上内容参考:百度百科——琼脂糖凝胶
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