Question

用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的分子量，为什么有时和凝胶层析法所得结果有所不同？

用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的分子量，为什么有时和凝胶层析法所得结果有所不同？是否所有的蛋白质都能用SDS-凝胶电泳法测定其分子量？为什么？

Answer 1

两种方法原理不同，有差异是正常的。如果差距较大，要仔细分析。
一般凝胶层析是非变性的，SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳是变性的，二硫键也被还原，所以是亚基（肽链）分子量。
凝胶层析与分子形状有关，一般marker都是球状蛋白，所以测球状蛋白分子量较准。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳与分子形状无关。
有些蛋白性质特殊，不适于用SDS-凝胶电泳法测定。比如结构特殊的，如胶原；带很多电荷的，如组蛋白；带有较大辅基的，如糖蛋白。

Answer 2

两种方法原理不同，有差异是正常的。如果差距较大，要仔细分析。
一般凝胶层析是非变性的，SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳是变性的，二硫键也被还原，所以是亚基（肽链）分子量。
凝胶层析与分子形状有关，一般marker都是球状蛋白，所以测球状蛋白分子量较准。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳与分子形状无关。
有些蛋白性质特殊，不适于用SDS-凝胶电泳法测定。比如结构特殊的，如胶原；带很多电荷的，如组蛋白；带有较大辅基的，如糖蛋白。 如果有条件你可以自己去实践下