Question

动物细胞培养中如何保证在传代过程中不被微生物污染

Answer 1

首先，器具应做无菌处理，通常要在培养液中添加一些抗生素，可防止污染，应定期更换培养液，以便清除代谢产物，防止其积累对细胞自身造成伤害。另外，要从实验步骤抓起，如下：
1．人无菌室之前用肥皂洗手，用75%酒精擦拭消毒双手。

2．倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否需要传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液置37℃下预热。3．超净台台面应整洁，用0.1%新洁尔灭溶液擦净。

4．打开超净台的紫外灯照射台面20min左右，关闭超净台的紫外灯，打开抽风机清洁空气，除去臭氧。

5．点燃酒精灯；取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管；安上橡皮头；过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内。

6．将培养用液瓶口用75%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上。

Answer 2

首先,洁净环境要达标.洁净间与超净台在使用之前都要经过至少半小时紫外灯照射灭菌.
其次,传代所用培养基要按使用说明进行灭菌处理.
最后,接种时要将手彻底消毒,或者戴灭菌手套操作,接种过程要在酒精灯旁操作.使用接种环、接种针前及使用过程中要将环或者针用酒精灯烧至发红,彻底灭菌.传代完成后要密封好再传出培养.