Question

质粒图谱4大要素

Answer 1

质粒解剖

质粒四大要素：

一、复制起点：控制着质粒的复制，并决定了质粒的宿主和拷贝数；

Ori 是质粒的复制起点（也称 origin ), ori 和它所控制的组分一起称为一个复制子， ori 调控整个质粒在大肠杆菌中滚环式复制，使得质粒可以得到大量扩增

质粒中有两个 origin 的，为穿梭质粒，既可以在原核细胞复制，也可在真核细胞中复制。

二、筛选标记： 多为抗性基因，以便加以检测筛选；

只存在单抗性的质粒多为原核克隆载体
和原核表达载体。

而存在两种或以上的抗性的多为真核表达质粒，多为穿梭质粒

真核表达质粒不仅含 如AmpR ，还有如NeoR 筛选标记

三、多克隆位点： 外源基因的插入位点；

多克隆位点简称 MCS ，图谱中的 MCS 区
或者许多内切酶集中的部分，就是质粒的多克隆位点，它一般位于转录启动和转录终止信号之间

多克隆位点是外源 DNA 的插入位点，一般可通过酶切后连接的方式将外源 DNA 插入质粒

四、其他件：如转录调控元件、翻译表达元件和蛋白标签等

质粒中除了复制起始位点、筛选标记、多克隆位点外，还具有其他一些表达或调控元件，

如，转录调控元件（启动子），

翻译调控元件

融合表达标签蛋白等