Question

琼脂糖电泳时，条带为何在点样孔中跑不出来？

急需，谢谢大家 ！！！

Answer 1

1）可能条带中（目的DNA）掺有基因组DNA（因基因组DNA分子量很大，不能从上样孔中出来）
2）可能条带中（目的DNA）掺有蛋白质（因蛋白质与DNA一起，分子量很大，不能从上样孔中出来）

总之，你目的DNA提取、分离的不纯，掺有基因组DNA或没有和蛋白质分离开，因此导致分子量大大加大，跑不出上样孔

还有一个可能，就是你电压没加上，或你电泳缓冲液是用蒸馏水配制的，没有离子，不能导电，DNA没有泳动。

Answer 2

marker也跑不出来吗?那通电的时候看到气泡了没?

如果看到了,说明电泳槽是通电了的,那么有以下几种可能:

1. Buffer 错了 (配胶的buffer应该和电泳槽的buffer保持一致, 如果用TAE配胶,就要用TAE buffer 跑胶)
2. 气泡问题,上样的时候点样孔里面是不是有气泡?
3. 电压在80V以下,跑得太慢,短时间观察不到
4. 用的agar浓度是多少?一般是0.8g-1g/100ml比较好.
5. 这个可能性不是很大,正负极接反了

如果没看到,说明电泳槽没有通电,那么有以下三种可能:

1. buffer太少了,没有没过通电的金属丝
2. 正负极插头没有插好,线松了
3. 电泳槽挂了

Answer 3

蛋白污染 抽提的时候把蛋白相吸起来了

Answer 4

是不是没插好啊