Question

生物化学 问题 请教大侠

Answer 1

分类: 教育/科学 >> 科学技术
问题描述:

一个多肽的一级结构为Leu—Pro—Ser—Trp—Ala。试描述该多肽在20℃，0.01M Tris-HCl，pH 7.0缓冲液中测得的紫外吸收光谱和荧光发射谱。

解析:

因为含有色氨酸的共轭结构

所以最大吸收波长在280nm处

在蛋白质分子中, 能发射荧光的氨基酸残基只有色氨酸

(Trp),酪氨酸(Tyr)以及苯丙氨酸(Phe), 其荧光谱对环境

极为敏感, 成为研究蛋白质的结构,折叠动力学以及蛋

白质分子间的相互作用的一种理想选择. 在这三种氨基

酸中, Trp的荧光强度最大, 而Phe的荧光强度则很低.

在同时含有Trp和Tyr的蛋白质中, 由于其分子发生了

从Tyr残基到Trp残基的能量转移, 从而导致Tyr残基

的荧光猝灭和Trp残基的荧光增加, 因而Trp最常被用

作内源探针来研究蛋白质的结构

Trp为内源探针时, 样品浓度为2.5×10-3 g/mL.

对于Tyr, 激发波长为274 nm, 发射谱的扫描范围

为290～400 nm; 而对于Trp, 激发波长为295 nm, 扫描

范围为300～450 nm. 激发和发射单色器的带宽均为5

nm.