PCR技术的基本原理是什么?
根据DNA扩增的目的和检测的标准,通常业界将PCR仪分为普通PCR仪、梯度PCR仪、原位PCR仪、实时荧光定量PCR仪等四类。
1.普通的PCR仪器:主要是做简单的,对目的基因退火温度的扩增,主要应用于科研研究,教学,医学临床,检验检疫等机构;
2.梯度PCR仪可一次性进行PCR扩增,主要用于研究未知DNA退火温度的扩增,主要用于科研,教学机构;
3.原位PCR仪用于细胞内靶DNA的定位分析,不但可以检测到靶DNA,又能标出靶序列在细胞内的位置,于分子和细胞水平上研究疾病的发病机理和临床过程及病理的转变有重大的实用价值;
4.实时荧光定量PCR仪实在普通PCR仪的基础上,增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,具有单通道、双通道和多通道之分,因一次只能检测一种目的基因的扩增量,需多次扩增才能检测完不同的目的基因片段的量,主要用于医学临床检测、生物医药研发、食品、科研院校等行业和机构。
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PCR技术的基本原理:
该技术是在模板DNA、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下,依靠于DNA聚合酶的酶促合成反应。DNA聚合酶以单链DNA为模板,借助一小段双链DNA来启动合成,通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模板中的一段互补序列结合,形成部分双链。
在适宜的温度和环境下,DNA聚合酶将脱氧单核苷酸加到引物3´-OH末端,并以此为起始点,沿模板5´→3´方向延伸,合成一条新的DNA互补链。
扩展资料:
PCR技术的应用:
PCR技术首次临床应用就是从检测镰状细胞和β-地中海贫血的基因突变开始的。
PCR在医学检验学中最有价值的应用领域就是对感染性疾病的诊断。理论上,只要样本有一个病原体存在,PCR就可以检测到。
PCR技术不但能有效的检测基因的突变,而且能准确检测癌基因的表达量,可据此进行肿瘤早期诊断、分型、分期和预后判断。
参考资料:百度百科—PCR(聚合酶链式反应)
2024-06-21 广告