什么叫反相色谱?试比较正相色谱与反相色谱的区别。
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【答案】:流动相的极性比固定相的极性强的色谱体系叫反相色谱。以十八烷基硅胶键合相(ODS)为固定相,以甲醇/水为流动相,就是典型的反相色谱。正相色谱与反相色谱这两种操作模式的主要区别如下。
(1) 固定相:正相色谱的固定相是极性的,反相色谱的固定相是非(弱)极性的。
(2) 流动相:正相色谱的流动相是非(弱)极性的,反相色谱的流动相是极性的。
(3) 流出次序:在正相色谱中,极性组分的容量因子K大,保留时间长,后流出;而在反相色谱中,极性组分的容量因子K小,保留时间短,先流出。
(4) 流动相极性的影响:在正相色谱中,随着流动相的极性增加,组分的容量因子K变小,保留时间变短;而在反相色谱中,随着流动相的极性增加,组分的容量因子K变大,保留时间变长。
(1) 固定相:正相色谱的固定相是极性的,反相色谱的固定相是非(弱)极性的。
(2) 流动相:正相色谱的流动相是非(弱)极性的,反相色谱的流动相是极性的。
(3) 流出次序:在正相色谱中,极性组分的容量因子K大,保留时间长,后流出;而在反相色谱中,极性组分的容量因子K小,保留时间短,先流出。
(4) 流动相极性的影响:在正相色谱中,随着流动相的极性增加,组分的容量因子K变小,保留时间变短;而在反相色谱中,随着流动相的极性增加,组分的容量因子K变大,保留时间变长。
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