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pH对酶活性的影响
一.目的
1.了解pH值对酶促反应速度影响。
2.掌握测定唾液淀粉酶活性的原理及定性方法。
二.原理
1.酶:由活细胞产生的,对其特异底物起高效催化作用的蛋白质。
2.酶促反应:酶所催化的化学反应。
3.影响酶促反应速度的因素:[S]、[E]、pH、温度、激动剂与抑制剂
过酸过碱都能使酶蛋白变性而使其丧失活性。在不致使变性的pH值范围内,酶的活性会因pH值不同而不同。由于酶是一种蛋白质,在不同氢离子浓度下,其解离的情况不同,但往往只有一种情况下才是该酶的最高活力,此时pH值称为酶的最适pH值。倘若其作用条件偏离最适pH值任何方面,都将引起酶活性的降低,减慢酶促反应速度。
唾液淀粉酶能使淀粉水解成一系列比较简单的化合物,最终产物为麦芽糖,利用其与碘液的不同呈色反应,即可推知淀粉酶水解淀粉的程度和pH对唾液淀粉酶的活性影响,并可指出唾液粉酶的最适pH。
淀粉 → 紫色糊精 → 红色糊精 → 麦芽糖
(遇碘呈蓝色、遇碘呈紫色、遇碘呈红色、遇碘呈淡黄色)
制备唾液:将放一薄层棉花的漏斗置于10ml量筒顶端,5名以上的学生吐1ml唾液,倒入100ml量筒中,用蒸馏水将小量筒冲洗倒入大量筒中,加蒸馏水至100ml,用吸量管混匀唾液。
取试管3支,编号,按表加各种试剂。
摇匀放入37℃水浴中保温3分钟,用滴管吸取pH6.8管内液体一滴,在白瓷盘中用碘液检查是否水解完全,然后向各管加碘液3滴,观察结果解释之。
你自己再看一下这个网
一.目的
1.了解pH值对酶促反应速度影响。
2.掌握测定唾液淀粉酶活性的原理及定性方法。
二.原理
1.酶:由活细胞产生的,对其特异底物起高效催化作用的蛋白质。
2.酶促反应:酶所催化的化学反应。
3.影响酶促反应速度的因素:[S]、[E]、pH、温度、激动剂与抑制剂
过酸过碱都能使酶蛋白变性而使其丧失活性。在不致使变性的pH值范围内,酶的活性会因pH值不同而不同。由于酶是一种蛋白质,在不同氢离子浓度下,其解离的情况不同,但往往只有一种情况下才是该酶的最高活力,此时pH值称为酶的最适pH值。倘若其作用条件偏离最适pH值任何方面,都将引起酶活性的降低,减慢酶促反应速度。
唾液淀粉酶能使淀粉水解成一系列比较简单的化合物,最终产物为麦芽糖,利用其与碘液的不同呈色反应,即可推知淀粉酶水解淀粉的程度和pH对唾液淀粉酶的活性影响,并可指出唾液粉酶的最适pH。
淀粉 → 紫色糊精 → 红色糊精 → 麦芽糖
(遇碘呈蓝色、遇碘呈紫色、遇碘呈红色、遇碘呈淡黄色)
制备唾液:将放一薄层棉花的漏斗置于10ml量筒顶端,5名以上的学生吐1ml唾液,倒入100ml量筒中,用蒸馏水将小量筒冲洗倒入大量筒中,加蒸馏水至100ml,用吸量管混匀唾液。
取试管3支,编号,按表加各种试剂。
摇匀放入37℃水浴中保温3分钟,用滴管吸取pH6.8管内液体一滴,在白瓷盘中用碘液检查是否水解完全,然后向各管加碘液3滴,观察结果解释之。
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参考资料: http://www.bbioo.com/bio101/2006/7226.htm
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生物体内不同的酶有它们对应的最适pH,例如胃蛋白酶,它的最适pH
为1.5-2.2,因此可以在胃酸的环境下发挥作用,其他的酶的最适pH一般都接近中性。过酸或过碱都能使酶的分子结构遭到破坏而失去活性。
为1.5-2.2,因此可以在胃酸的环境下发挥作用,其他的酶的最适pH一般都接近中性。过酸或过碱都能使酶的分子结构遭到破坏而失去活性。
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过氧化氢酶可通过判断气泡产生的多少来测定pH值对酶活性的影响
用淀粉的不好...因为在碱性条件下碘液会反映。淀粉会水解。(突然忘记是酸性还是碱性。)总之用过氧化氢会比较好。你再套下模式就OK拉
用淀粉的不好...因为在碱性条件下碘液会反映。淀粉会水解。(突然忘记是酸性还是碱性。)总之用过氧化氢会比较好。你再套下模式就OK拉
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设置几个梯度ph,其它因素全部相同,让酶与底物在相同的条件下发生反应,再测OD值,绘制
PH对酶活性的影响曲线
PH对酶活性的影响曲线
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H2O2和过氧化氢酶。看气泡多少。
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