Sanger法测序的原理是什么？
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Sanger法测序的原理就是利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物。直到掺入一种链终止核苷酸为止。每一次序列测定由一套四个单独的反应构成，每个反应含有所有四种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)，并混入限量的一种不同的双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3-OH基因，使延长的寡聚核苷酸选择性地在G、A、T或C处终止。终止点由反应中相应的双脱氧而定。每一种dNTPs和ddNTPs的相对浓度可以调整，使反应得到一组长几百至几千碱基的链终止产物。它们具有共同的起始点，但终止在不同的核苷酸上，可通过高分辨率变性凝胶电泳分离大小不同的片段，凝胶处理后可用X-光胶片放射自显影或非同位素标记进行检测。
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Sanger法是根据核苷酸在某一固定的点开始，随机在某一个特定的碱基处终止，并且在每个碱基后面进行荧光标记，产生以A、T、C、G结束的四组不同长度的一系列核苷酸，然后在尿素变性的PAGE胶上电泳进行检测，从而获得可见的DNA碱基序列。
其实就是在四个不同的反应体系中加入不同的终止剂，让DNA互补链的合成分别随机的停止在A、C、G、T处，然后去跑个高分辨率的胶，跑的最远的就是第一个碱基，然后依次类推，分别可以读出其碱基的排序
其实就是在四个不同的反应体系中加入不同的终止剂，让DNA互补链的合成分别随机的停止在A、C、G、T处，然后去跑个高分辨率的胶，跑的最远的就是第一个碱基，然后依次类推，分别可以读出其碱基的排序
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