Question

细菌划线分离法有哪几种划线方式，划线时应注意什么

Answer 1

用的是四区划线法或五区划线法
划线的形式有多种,可将一个平板分成四个不同面积的小区进行划线,第一区(A区)面积最小,作为待分离菌的菌源区,第二和第三区(B、C区)是逐级稀释的过渡区,第四区(D区),则是关键区,使该区出现大量的单菌落以供挑选纯种用.为了得到较多的典型单菌落,平板上四区面积的分配应是D＞C＞B＞A.
顺便说一下,划线划得好看不好看并不重要,只要分离效果好就行,每个人都可以有自己理想的划线方法,但最关键的依然是效果.此外大致判断接种环上的菌量也是日常积累的经验之一,判断得好就能将细菌分离得更好.

注意事项
1、平板不能倒得太薄，最好在使用前一天倒好。为防止平板表面产生冷凝水，倒平板前培养基温度不能太高。
2、用于平板划线的培养基，琼脂含量宜高些（2%左右），否则会因平板太软而被划破。 3、用于划线的接种环，环柄宜长些（约10cm），环口应十分圆滑，划线时环口与平板间的夹角宜小些，动作要轻巧，以防划破平板。
4、为了取得良好的划线效果，可事先用圆纸垫在空培养皿内画上4区，并用接种环练习划线动作，待通过模拟试验熟练操作和掌握划线要领后，再正式进行平板划线。